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第一章绪论

1.什么是下游技术？所用原料及产品的特性？

对于由生物界自然产生的，由微生物菌体发酵的，动植物细胞组织培养的，酶反应等耕

种生物工业生产过程获得的生物原料，经提取分离加工并精致目的成分，最终使其成为

产品的技术，通常称为下游技术。

2.生物产品与普通化工产品分离过程有何不同？

a传统生化产品都为小分子，理化性能已知，放大比较有根据，基因工程产品都是大分

子，数据缺乏，放大多凭经验。B基因工程产品多处于细胞内，提取前需要细胞破碎。

而且发酵液产物浓度也较稀，杂志又多，加上大分子比较不稳定，故提取较困难，常需

要利用高分辨力的精制方法，如色层分离等。

3.下游技术的一般工艺过程及特点？

流程：a发酵液的预处理和固液分离b初步纯化c高度纯化d成品加工特点：A发

酵液成分复杂b培养液产物浓度低c欲提取的生物物质通常很不稳定，d弹性要求大

4.生物技术下游加工过程的重要性？

5.初步纯化与高度纯化分离效果有何不同？

6.设计生物产品的分离工艺应考虑哪些因素？

第二章发酵液的预处理和固液分离方法

1.发酵液预处理的方法有哪些？

A在活性物质稳定性的范围内，通过酸化，加热，以降低发酵液的粘度。B加入絮凝剂，

使细胞或者大分子凝结成较大的颗粒。

2.絮凝和凝聚的定义和区别。常用的絮凝剂有哪些？

凝聚：在中性盐的作用下，由于双电层排斥电位的降低，而使胶体体系不稳定的现象。絮凝：

在某些高分子絮凝剂存在下，基于架桥作用，使胶粒形成粗大的絮凝团的过程，是一种以物

理的集合为主的过程。絮凝剂：a聚丙烯酰胺类衍生物b聚苯乙烯类衍生物c无机高分子

聚合物絮凝剂，如聚合铝盐d天然有机高分子絮凝剂：多聚糖类胶黏剂，海藻酸钠，明胶，

骨胶。

4.影响絮凝效果的因素有哪些？

A絮凝剂浓度b絮凝剂分子量c絮凝剂类型d溶液的phe搅拌速度和时间f助凝剂

5.发酵液分离的主要方法有哪些？

a高价无机离子的去除方法：去除钙离子：草酸法。去除镁离子：三聚磷酸钠。除去铁

离子：加入黄血盐。B杂蛋白的去除方法：等电点法，热变性法，c凝聚和絮凝技术。

6.分离和过滤的主要设备有哪些?

1，板框压滤机2，鼓式真空过滤机3,离心分离机4，错流过滤机

第三章微生物细胞的破碎

1.微生物细胞常用的破碎方法有哪些？

一机械法：（珠磨法，高压匀浆法，超声破碎法，X-press法）二非机械法（酶溶法，化学

渗透法，渗透压法，冻结融化法，干燥法）

2.超声波破碎时，影响生物产品收率的因素有哪些？

1温度上升：当气泡破裂时，绝大部分释放出来的能以热的形式为液体说吸收，为了避免

高温，悬浮液应先冷却到0—5度，并且还应用冷却液连续通入容器夹套，即短期的声波破

碎与短期的冷却交替作业，声波破碎|冷却的时间比率称为“负载因素”。2化学效应：超声

处理会引起诸如生成游离基这样的化学效应，他可能对某些需要的分子带来破坏性影响，但

对破碎细胞毫无影响；可通过添加游离基清除剂如胱氨酸或谷胱甘肽，或者用氢气预吹细胞

悬浮液来缓和。

3.什么是破碎率？其测定方法有哪些？

破碎率：被破碎细胞的数量占原来细胞数量的百分比数。

方法：1直接测定法2测定释放的蛋白质量或酶活力3测定导电率

第四章沉淀法

1.盐析的作用机理是什么？

蛋白质胶体稳定的原因：电荷和水化膜。蛋白质-COOH–NH2和-OH都是亲水基团，与

水形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成1-100nm的亲水胶体，削弱了蛋白质分子之间

的作用力，极性基团越多，水化层越厚，蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大，因而溶

解度也越大。

2.什么是亲和沉淀，其主要操作步骤是什么？

亲和沉淀：利用蛋白质与特定分子的专一性反应，选择性极强的分离技术，其沉淀原理不

是依据蛋白质溶解度的差异，而是依据“吸附”有特殊蛋白质的聚合物的溶解度的大小。

步骤：1目标蛋白质与亲和配位体络合形成沉淀，2所得沉淀物