wei-et-al-2023-红细胞裂解预处理可显著提高梅毒螺旋体 DNA 的产量（1）.pdfVIP

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研究文章

红细胞裂解预处理可显著改善

从血液中提取梅毒螺旋体

DNA

AAAda,b丽丽转换，b，c

Zi‑Han

Wei,

Lin

Xie,

Yong‑Jing

Wang,

Jiang‑Xing

Zhuang,

Jian‑Jun

Niu,

a厦门大学医学院中山医院检验中心，厦门，中国b厦门大学医学院传染病研究所，厦门，中国c厦门市临床检验质量控制中心，厦门，

中国

d厦门大学医学院神经科学研究所，福建省神经退行性疾病与衰老研究重点实验

室，厦门，中国

摘要PCR

可以作为梅毒螺旋体血清学检测的补充。然而，其灵敏度对于血液样本检测并不令人满意。本研究旨在调查

用红细胞

(RBC)

裂解物进行预处理是否可以提高从血液中提取梅毒螺旋体亚种

DNA

的产量。我们开发并验证了一

种定量

PCR

(qPCR)

检测方法，该方法利用

TaqMan

技术通过靶向

polA

基因来特异性检测梅毒螺旋体

DNA。在生

理盐水

(NS)、全血、血浆和血清中制备含有

106至

100

个梅毒螺旋体/mL

的模拟培养基，并对部分全血进行

RBC

裂

解预处理。然后，从

50

只梅毒兔子身上抽取的血液样本被平行分成五组，标记为全血、全血/裂解红细胞、血浆、血清和

血细胞/裂解红细胞。

DNA提取和qPCR检测，比较不同组间的检出率和拷贝数。polA方法线性良好，扩增效率高达102％。在模拟血液样本

中，polA方法的检出限在全血/裂解红细胞、血浆和血清中达到1

102个梅毒螺旋体/mL，而在NS和全血中检出限仅为

1

104个梅毒螺旋体/mL。在梅毒兔血液样本中，全血/裂解红细胞的检出率最好（82.0％），全血的检出率仅为6％。

全血/裂解红细胞的拷贝数高于全血。红细胞裂解预处理可以显著提高全血中梅毒螺旋体DNA的产量，且产量优于全

血、血浆、血清和血细胞/裂解红细胞。

重要性梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，可扩散到血液中。PCR

可在血液中检测到梅毒螺旋体

DNA，但灵

敏度低。很少有研究将红细胞裂解预处理应用于血液梅毒螺旋体

DNA

的提取。本研究表明，全血/裂解红细胞的检测

限、检出率和拷贝数优于全血、血浆和血清。经过红细胞裂解预处理后，低浓度梅毒螺旋体

DNA

的产量得到提高，基于

血液的梅毒螺旋体

PCR

的低灵敏度得到改善。因此，全血/裂解红细胞是获取血液梅毒螺旋体

DNA

的理想样本。

编辑

Susan

Realegeno,

Quest

Diagnostics

版权所有

©

2023

Wei

等人。这是一篇开放获取的文章，