动物学病理检材的提取、固定、取材及保存规范.pdf

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涉案动物病理学检材的提取、固定、取材及保存规范鉴定标准

一、范围

本规范规定了动物学病理检材提取、固定、取材及保存的操作流程和技术要求,适用于动物学研究、教学、

临床诊断、疫病监测及司法鉴定等活动中涉及的病理检材处理。

二、术语和定义

病理检材

从动物机体获取的,用于病理学检查、分析和诊断的组织、器官、细胞、体液等材料。

提取

运用适当的技术和方法,从动物体采集病理检材的操作过程。

固定

采用化学试剂或物理方法使病理检材中的生物大分子保持原有状态和结构的处理过程。

取材

从已固定的病理检材中选取适宜部分用于后续制片、检验或研究的操作。

保存

运用适当的条件和方法对病理检材进行储存,以维持其质量和特性的过程。

三、病理检材的提取

1、提取准备

1.1器械与工具准备

准备解剖刀、手术剪、镊子、止血钳、注射器、采样管、无菌棉签、载玻片、离心管等器械和工具。所有

器械和工具使用前应进行清洁、消毒和灭菌处理,确保无菌状态。

1.2防护装备准备

操作人员应穿戴一次性无菌手术衣、手套、口罩、护目镜、帽子等防护装备,防止自身感染和检材污染。

1.3记录用品准备

准备好记录表格、标签、记号笔等,用于记录检材的来源、种类、采集时间、采集部位、采集方法等信

息。

2、提取时机

2.1自然死亡的动物

1

对于自然死亡的动物,应在死亡后尽快(一般不超过6-24小时,具体时间根据动物种类、环境温度和病

变类型等因素确定)进行检材提取。在高温、潮湿等环境条件下,应尽快缩短提取时间间隔,以减少死后

自溶、腐败和微生物污染对检材质量的影响。

2.2实验动物

对于实验动物,应根据实验设计和研究目的,在预定的时间点进行检材提取。如果实验动物因疾病需要安

乐死,应在实施安乐死后立即进行检材提取,确保检材的新鲜度和完整性。

2.3临床病例

对于临床病例,应在动物接受治疗前或治疗过程中,根据疾病的发展和诊断需要,适时进行检材提取。对

于需要手术治疗的病例,可在手术过程中采集病变组织和器官等检材。

3、提取方法

3.1组织检材提取

根据动物的种类、体型、病变部位和研究目的,选择合适的解剖部位和切口位置。在进行解剖操作前,应

对动物体表进行消毒处理,防止体表微生物污染检材。

使用无菌解剖器械,小心地切取病变组织及其周围一定范围(一般为0.5-1.0cm)的正常组织。组织块大

小一般为1.0cm×1.0cm×0.3cm-1.5cm×1.5cm×0.5cm,对于微小病变或特殊病变,可适当调整组织块大小。

在切取组织检材时,应避免过度牵拉、挤压和损伤组织,保持组织的原有形态和结构。对于多个病变部位

或不同类型的病变,应分别提取检材,并做好标记和记录,注明检材的来源、病变类型、采集时间和采集

部位等信息。

3.2器官检材提取

完整地摘取病变器官或目标器官,在摘取过程中应注意保护器官的血管、神经和结缔组织,避免损伤和撕

裂。

去除器官表面的结缔组织、脂肪、筋膜和其他附着物,用生理盐水轻轻冲洗干净,去除表面的血液、脓液

和污染物。

将摘取的器官检材放入无菌容器或保鲜袋中,做好标记和记录,尽快进行固定处理。

3.3细胞检材提取

体腔积液采集

对于体腔积液(如胸腔积液、腹腔积液、心包积液等),使用无菌注射器连接适当规格的针头(如18-

22G针头),在无菌操作条件下进行穿刺采集。穿刺部位应选择在积液较多且安全的部位,如胸腔穿刺可

选择在肋间隙、腹腔穿刺可选择在脐与耻骨联合连线中点等部位。

在穿刺过程中,应缓慢进针,避免损伤内脏器官和血管。当针头进入体腔后,缓慢抽取适量积液(一般为

2-10ml,具体抽取量根据积液量和研究需要确定),注入无菌离心管中。

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采集完成后,立即将离心管密封,做好标记和记录,尽快进行离心处理,收集细胞沉淀。

3.4细胞涂片采集

使用无菌刮片、毛刷或吸管等工具,采集病变部位的细胞,将细胞均匀涂抹在载玻片上,制作涂片。涂片

的厚度应适中,避免过厚或过薄。

对于液体样本(如血液、脑脊液、尿液等),可采用离心涂片法。将样本加入离心管中,进行离心处理

(离心速度和时间根据样本类型和研究需要确定),收集细胞沉淀,用吸管将细胞沉淀滴加在载玻片上,

制作涂片。

3.5体液检材提取

血液采集

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