开发用于快速检测实时聚合酶螺旋反应的检测方法.pdfVIP

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《应用生物学与生物技术杂志》第

11

卷（增刊

1），第

34‑39

页，2023

年

12

月

可在线访问

http://www.jabonline.in

DOI：10.7324/JABB.2023.145559

开发实时聚合酶螺旋反应检测方法，用于快速直观地检测

苍白密螺旋体

克里希那莫西·普里亚、艾西卡·达斯、拉姆亚·莫汉达斯*

印度泰米尔纳德邦钦奈

SRM

科学技术研究所遗传工程系。

文章信息抽象的

文章历史：

梅毒螺旋体是一种细菌，是引起性传播疾病梅毒的病原体。目前，梅毒的治疗依赖于基于血清的检测方法和暗视野观察梅毒螺旋体。但这些鉴

收讫日期：2023

年

7

月

6

日

定方法在感染初期效果不佳。在本研究中，我们开发了一种实时聚合酶螺旋反应（PSR）来检测梅毒螺旋体DNA的polA基因。PSR反应条件优

接受日期：2023

年

11

月

12

日

在线发售日期：2023

年

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月

15

日化为62°C，45分钟。在PSR反应的实时熔解曲线分析中，

polA基因显示出明显的熔解峰，Tm值为80±0.5°C。发现所开发方法的检测限为

100×

10−12μg

/μL。通过利用几种细菌来评估特异性，该方法仅对梅毒螺旋体具有100%的特异性。该方法快速、高效，可以作为诊断梅毒螺

旋体感染的补充方法。

关键词:血清

学方法,梅毒螺旋体,聚

合酶螺旋反应,

polA,

实时熔解曲线分析。

文章重点梅毒螺旋体检测。梅毒螺旋体检测包括：荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验、梅毒螺旋体血凝试验

(TPHA)

和梅毒螺旋体颗粒凝集试验，用于检测患者样本中可发现的

IgM

和

IgG

抗体。非梅毒

‧采用两种实时

PSR

和

PSR

染料视觉判读方法检测梅毒螺旋体，反应时间少于

45

分钟。

螺旋体检测包括快速血浆反应素试验和性病研究实验室

(VDRL)

试验，用于检测针对梅毒螺旋

体心磷脂和卵磷脂抗原的抗体[

4]。

‧PSR

方法不需要昂贵的设备，并且有效

防止气溶胶污染。

‧简单、廉价的

PSR

方法在控制感染方面发挥着有效作用，尤其是在高流

对于原发性梅毒，窗口期可能导致假阴性结果。随后需要进行长达

3

个月的随访。然而，这会导

行率的情况下。

致诊断延迟、严重的健康并发症和持续传播[5]。

1.

引言

梅毒螺旋体是一种螺旋体细菌，可导致性传播疾病梅毒[1]。根据感染各个阶段（原发性、继发

性和三级）的临床表现，致病性梅毒螺旋体可分为

3

个主要