高中三年级上学期生物《目的基因的检测和鉴定》教学课件.pptx

目的基因的筛选与获取

基因表达载体的构建

将目的

基因导入受体细胞

目的基因进入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性呢？

？

请同学们根据中心法则原理，思考：

1.如何确定目的基因进入了转基因生物受体细胞并能维持稳定？

2.如何确定转基因生物细胞中的目的基因一定能够进行表达？

3.如何确定转基因生物获得了新的性状？

思路2：在RNA水平上，检测目的基因是否成功转录；

思路1：在DNA水平上，检测目的基因是否成功插入；

思路3：在蛋白质水平上，检测目的基因是否成功翻译；

思路4：在性状水平上，检测生物特定性状是否成功表现。

思考讨论：目的基因的检测与鉴定的实验方法

1.检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因

（2）方法：DNA分子杂交

DNA探针，是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的基因能发生碱基互补配对的DNA序列。

（1）原理：DNA分子具有特异性

DNA探针

待测生物DNA

①提取出转基因生物的基因组DNA，并将其切割成小分子DNA片段；

②制作探针，将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记；

③使探针和转基因生物的基因组杂交，若显示出杂交带，表明基因组中已插入目的DNA。

（3）具体过程:

1.检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因

2.检测转基因生物的目的基因是否成功转录为RNA

（2）方法：RNA分子杂交

RNA探针，是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的RNA能发生碱基互补配对的RNA序列。

（1）原理：RNA分子具有特异性

RNA探针

待测生物RNA

2.检测转基因生物的目的基因是否成功转录为RNA

①提取出转基因生物的全部RNA；

②制作探针，将与含目的基因的RNA互补的RNA片段用放射性同位素等作标记；

③使探针和转基因生物的RNA杂交，若显示出杂交带，表明目的基因成功转录为RNA。

（3）具体过程:

①首先取出转基因生物的蛋白质；

②制备特定蛋白质相应的抗体；

③向基因生物的蛋白质组中加入抗体，若显示出杂交带，表明目的基因已成功翻译为蛋白质。

（3）过程:

3.检测转基因生物的目的基因是否成功翻译为蛋白质

（2）方法：抗原—抗体杂交

（1）原理：蛋白质分子具有特异性，利用抗原与抗体特异性结合的原理

例如：怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢？

没有抗虫基因

的棉植株

有抗虫基因的棉植株

棉铃虫

虫没有死

虫被杀死

没有表达

若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。

4.检测转基因生物是否表现出特定的性状，如抗虫、抗旱等

目的基因成功表达

常见转基因生物在个体水平上鉴定、检测的方法:

转基因生物

检测方法

观察目标

抗虫植物

饲喂害虫

害虫死亡

抗病毒

(菌)植物

病毒(菌)感染

未侵染上病斑

抗盐植物

盐水浇灌

正常生长

抗除草

剂植物

喷洒除草剂

正常生长

小结

目的基因的筛选与获取

基因表达载体的构建

将目的

基因导入受体细胞

基因工程已步入产业化发展阶段，具有巨大生产力和发展潜力。充满信心和期待的同时，要严格规范操作流程，科学、客观地评估风险。

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