考点通关卷35 基因工程（解析版）.docxVIP

通关卷35基因工程

考点01重组DNA技术的基本工具

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学问填空

考点必背学问巩固基础落实建议用时：12分钟

1.切割DNA的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶，这类酶主要是从中分别纯化出来的。它们能够的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，产生两种形式的末端。（P71）

2.DNA连接酶分为两类，一类是，另一类是。后者既可以缝合双链DNA片段互补的，又可以缝合双链DNA片段的，但连接后者的效率比较低。（P72）

3.质粒是一种暴露的、结构简洁、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制力量的分子。（P72）

4.在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在自然?质粒的基础上进行过的。这些质粒上常有特殊的基因，如四环素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，便于重组DNA分子的筛选（如下图）。（P72）

大肠杆菌及质粒结构模式图

5.在基因工程中使用的载体除质粒外，还有、等。它们的来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。（P73）

6.载体必需具备的条件：①能在受体细胞中保存下来并能；②具有1个或多个，以便与外源基因连接。③具有。（P73）

7.DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分别DNA与蛋白质。DNA在的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在肯定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。（P74“探究·实践”）

【答案】

1.原核生物识别双链DNA分子磷酸二酯键黏性末端或平末端2.E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶黏性末端平末端3.环状双链DNA4.人工改造标记5.噬菌体动植物病毒6.自我复制限制酶切割位点标记基因7.不同浓度蓝色

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试题精练

考点巩固题组突破分值：50分建议用时：15分钟

一、单选题

1．透亮?????质酸是一种应用广泛的黏多糖，争辩者欲改造枯草芽孢杆菌提高透亮?????质酸的生产产量。透亮?????质酸合成酶基因H上的一段核苷酸序列为“一ATCTCGAGCGGG—”，则对该序列进行剪切的限制酶识别的核苷酸序列最可能为（????）

A．—TCTCGA— B．—CTCGAG—

C．—CGAGCG— D．—TCGAGC—

【答案】B

【分析】切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

【详解】该核苷酸序列“一ATCTCGAGCGGG—”的互补序列为“-TAGAGCTCGCCC-”,限制酶切割DNA需两条链都有识别位点（即识别片段两条链序列成倒序），若选—TCTCGA—片段，则另一互补链上（从右到左）应当含有—AGAGCT—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段；若选—CTCGAG—片段，则另一互补链上（从右到左）应当含有—CTCGAG—，互补链上存在该序列片段，能选该片段；若选—CGAGCG—片段，则另一互补链上（从右到左）应当含有—GCTCGC—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段；若选—TCGAGC—片段，则另一互补链上（从右到左）应当含有—AGCTCG—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段，综上分析可知，对该序列进行剪切的限制酶识别的核苷酸序列最可能为—CTCGAG—，ACD不符合题意，B符合题意。

故选B。

2．下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是（????）

A．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键

B．限制酶切割DNA后肯定能产生黏性末端

C．T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低

D．微生物中的限制酶对自身DNA有损害作用

【答案】C

【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成产生黏性末端或平末端两种。（2）DNA连接酶：据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性未端，此外T4DNA连接酶还可以连接平未端，但连接平未端时的效率比较低。（3）运载体：最常用的载体类型：质粒。除此之外，还有噬菌体、动植物病毒。

【详解】A、DNA连