- 1、本文档共12页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
北京泰普舜康医学检验所作业指导书编号:BJTIB-SOP-PCR057
解脲脲原体(UU)核酸定量检测标准操作规程(荧光PCR法)第一版
第1页共12页第0次修改
解脲脲原体(UU)核酸定量检测标准操作规程
(荧光PCR法)
1.目的
规范解脲脲原体(UU)核酸DNA定量(PCR-荧光探针法)检测操作流程,准确进
行解脲脲原体(UU)DNA定量分析。
2.应用范围
使用泰普生物科学(中国)有限公司解脲脲原体(UU)核酸扩增(PCR)荧光检测试剂
盒和Mx3000P荧光定量PCR仪、Roche480荧光定量PCR仪进行解脲脲原体(UU)DNA
检测。
3.职责
由PCR实验室制定程序文件,专业技术人员负责执行,实验室主管负责监督实施。
4.内容
4.1实验原理及其临床应用
采用聚合酶链式反应(PCR)及荧光标记探针技术,快速检测临床样品中解脲脲原体特有
序列,从而判断解脲脲原体的存在。适用于对生殖道、尿道分泌物拭子样本中的解脲脲原
体(UU)核酸进行体外定性检测,可用于解脲脲原体感染的辅助诊断及疗效监控。
4.2标本采集
4.2.1使用标本类型:生殖泌尿道分泌物等。
4.2.2标本采集
4.2.2.1生殖泌尿道分泌物
4.2.2.1.1男性:用细小棉拭子伸入尿道约2~4厘米,捻动拭子采集分泌物,将棉拭子置于
无菌玻璃管中,密封送检(采集分泌物前2小时禁小便)。
北京泰普舜康医学检验所作业指导书编号:BJTIB-SOP-PCR057
解脲脲原体(UU)核酸定量检测标准操作规程(荧光PCR法)第一版
第2页共12页第0次修改
4.2.2.1.2女性生殖道:用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物,再用宫颈刷或无菌棉拭子
插入宫颈内,停5秒后旋动宫颈刷或棉拭子采集宫颈分泌物,将宫颈刷或棉拭子置于无菌玻
璃管中,密封送检。
4.2.2.1.3女性尿道:用无菌生理盐水棉球洗净尿道口,再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米,
捻动拭子采集分泌物,将棉拭子置于无菌玻璃管中,密封送检。
4.2.3标本保存和运送:标本可立即用于测试,也可保存于-20℃待测,保存期为6个月。
标本运送时应采用0℃冰壶。
4.3试剂准备
4.3.1供应商:泰普生物科学(中国)有限公司
4.3.2此实验试剂应放在冰箱-20℃保存,在实验前5分钟取出备用,实验后应立即放回
冰
箱-20℃。
4.3.3如果试剂出现了封口蜡破损导致液体外漏以及过期试剂,应及时更换。
4.4标准品和质控品
4.4.1标准品、质控品来源:随试剂盒,由厂家提供。
4.4.2标准品、质控品保存条件:置于-20℃冰箱中保存。
4.4.3标准曲线和质控频度:每次实验均需做标准曲线和质控。
4.5操作过程说明
4.5.1DNA提取
4.5.1.1质控品处理:分别取出UU阴性、弱阳性、阳性质控品,8,000rpm离心数秒,各
吸50ul至1.5灭菌离心管中,加入50ulDNA提取液充分混匀,100℃恒温处理10±1分钟。
将处理好的质控品转至4℃静置10min,10000rpm离心5min,4℃保存备用。
北京泰普舜康医学检验所作业指导书编号:BJTIB-SOP-PCR057
解脲脲原体(UU)核酸定量检测标准操作规程(荧光PCR法)第一版
第3页共12页
文档评论(0)