DNA修复教学课件.ppt

在大肠杆菌中UvrABCD修复系统（继续2）UvrA107kDATPbindingsitesWeakATPase/GTPaseHelix-turn-helixDNA-bindingmotifContainsaflexiblepolyglycineregionUvrB76kD5’-3’ATPase-helicasewhencomplexedwithUvrATranslocatesalongDNAlookingfordamageUvrC67.5kDsingle-strandedDNAbindingprotein5’and3’incisionasewhencomplexedwithUvrB-DNAUvrD82kDHelicasewhichseparatesdamagedoligonucleotidefromintactstrandCellsurvivalUVwild-typeuvrAmutant大肠杆菌（左）和人类（右）的核苷酸切除修复过程HumanE.coli22568比较原核生物和真核生物中核苷酸切除修复Bacterial MammalianUvrA RPA,TFIIHUvrB XPA(damagerecognition) andXPG(cleavage)UvrC XPF,ERCC1UvrD TFIIH4proteins 18polypeptides~12ntreleased ~29ntreleasedWEAVER:FIG.20.43人类染色体的核苷酸切除修复(a)XPC-hHR23B蛋白质复合物识别嘧啶二聚体，XPA促进DNA解链(b)TFIIH的DNA解链酶活性扩展解链区域(c)RPA促进定位两种内切核酸酶XPG和ERCC1-XPF从DNA剪下24TO32-NT的片段(d)DNA聚合酶填充缺口，DNA连接酶封闭DNA骨架4直接修复1)光复活作用WEAVER:FIG.20.39光复活作用的模型可见光（400nm)激活DNA光复活酶，分解由UV而形成的环丁烷嘧啶二聚体2)O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)直接修复烷基化改变碱基配对的性质如果不修复，就会在复制后导致一个从G?C到A?T的突变甲基化复制复制校正配对的DNA(无突变)WEAVER:FIG.20.37ALKYLATIONOFGUANINEBYETHYLMETHANESULFONATECANLEADTOATRANSITIONMUTATIONUPONREPLICATIONOFTHEMODIFIEDDNAEthylmethanesulfonate甲基转移酶直接修复Transcriptionalactivator!甲基转移到酶自身的半胱氨酸残基上，得以修复活性灭活WEAVER:FIG.20.40O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的机制***************1，DNA分子的自发性损伤互变异构-碱基的脱氨基作用2，物理因素引起的DNA损伤紫外线照射-形成嘧啶二聚体电离辐射-碱基脱落、链断裂3，化学因素引起的DNA损伤烷化剂对DNA的损伤碱基类似物对DNA的损伤DNA修复一，DNA损伤脱氨基反应1，DNA分子的自发性损伤C胞嘧啶→U尿嘧啶A腺嘌呤→I次黄嘌呤G鸟嘌呤→X黄嘌呤5-甲基胞嘧啶→T胸腺嘧啶紫外线照射-形成嘧啶二聚体2，物理因素引起的DNA损伤电离辐射-碱基脱落、链断裂脱嘌呤反应?-FuranoseN-?糖苷键被水解WEAVER:FIG.20.36ELECTRON-RICHCENTERSINDNAARETARGETSFORALKYLATIONRED:TARGETSMOSTCOMMONLYATTACKEDBLUE:OTHERPOSSIBLETARGETS3，化学因素引起的DNA损伤烷化剂对DNA的损伤甲基化产生的O6甲基鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对，而不是与胞嘧啶配对WEAVER:FIG.20.37ALKYLATIONOFGUANINEBYETHYLMETHANESULFONATECANLEADTOATRANSITIONMUTATIONUPON