色谱分析法概论.ppt

【实验装置】前沿线色斑起始线图3-6薄层色谱示意图第61页,共65页，星期六，2024年，5月定性分析与定量分析斑点Rf值定性斑点原位薄层扫描定性洗脱定量第62页,共65页，星期六，2024年，5月薄层色谱法纸色谱法（纸层析法）第63页,共65页，星期六，2024年，5月纸色谱法（纸层析法）第64页,共65页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第65页,共65页，星期六，2024年，5月**气相色谱专家系统?expertsystemofgaschromatography?一个具有大量气相色谱分析方法的专门知识和经验的计算机软件系统。它应用人工智能技术，根据色谱专家提供的专门知识和经验进行推理和判断，模拟色谱专家来解决那些需要专家才能解决的气相色谱问题。如我国大连化学物理研究所研制的专家系统（ESC系统）包括色谱分离模式的推荐；气相色谱柱系统及样品预处理方法的推荐；气相色谱操作条件最佳化；气相色谱在线定性、定量分析等主要内容**adsorptionisothermAnadsorptionisothermforasinglegaseousadsorptiveonasolidisthefunctionwhichrelatesatconstanttemperaturetheamountofsubstanceadsorbedatequilibriumtothepressure(orconcentration)oftheadsorptiveinthegasphase.Thesurfaceexcessamountratherthantheamountadsorbedisthequantityaccessibletoexperimentalmeasurement,but,atlowerpressures,thedifferencebetweenthetwoquantitiesbecomesnegligible.**马丁和辛格研究出了一种更简单的色谱法；叫做纸色谱法（图12－3）。各种氨基酸能够在一张滤纸上被分开（一种用特别纯的纤维素制成的吸水纸）。把1~2滴不同氨基酸的混合液滴在滤纸的一个角上，然后把滤纸这一边的边缘浸入了醇一类的溶剂中。由于毛细作用，溶剂沿着滤纸慢慢地移动。（将吸水纸的一角浸入水中，你就会看到这种现象。）溶剂经过液滴时顺便带上氨基酸分子，因而使氨基酸分子也沿着滤纸移动。如同淀粉色谱法一样，每种氨基酸都以特定的速率沿滤纸移动。过一段时间以后，混合液中的各种氨基酸便在滤纸上分成一系列的斑点。有些斑点可能含有两种或三种氨基酸。要把这些氨基酸再分开，需要等滤纸干燥以后，把滤纸从原来的位置旋转90度，然后把新的边缘浸入第二种溶剂中，这种溶剂将把这几种氨基酸再分别沉积成几个斑点。最后，待整张滤纸干燥以后，再用化学药品冲洗，使氨基酸的斑点带色或变黑。这真是一种富有戏剧性的奇观：原来混合在一种单一溶液中的各种氨基酸，现在布满整张滤纸，就像一幅由彩色斑点拼成的工艺品。有经验的生物化学家根据斑点所占的位置，能够识别出每一种氨基酸，几乎一眼就能看出原蛋白质的成分。把一个斑点溶解，他们甚至能够测量出这种蛋白质中某种氨基酸的含量。由于对这项技术的发展，马丁和辛格获得1952年的诺贝尔化学奖。图示分离机制：各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分开第29页,共65页，星期六，2024年，5月Ka的意义若Ka值较小，则说明该组分在固定相保留作用较弱，不易被吸附，迁移速度快，先流出柱。第30页,共65页，星期六，2024年，5月2.吸附等温线一定温度下，组分在吸附剂表面被吸附达到平衡时，组分在两相中浓度相对关系的曲线，称为吸附等温线（adsorptionisotherm）横坐标为组分在流动相的浓度，纵坐标为在固定相的浓度。一般分为直线型、凸型和凹型三种第31页,共65页，星期六，2024年，5月凸形等温线吸附剂表面有不同吸附力的位点，组分分子优先占据高吸附力位点。在浓度较低时，组分吸附牢靠较难洗脱，高浓度时，吸附在低吸附位点的组分分子吸附较为松散，洗脱快，导致组分在浓度较高区域迁移速度快于浓度较低区域，流出曲线为前缘陡峭，后部托位的不对称峰形。