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PSA的检测及临床意义
;前列腺特异抗原(ProstateSpecificAntigen,PSA)是与前列腺癌相关的一种抗原。它是公认的诊断前列腺癌的较好的肿瘤标志物。前列腺癌在男性所有类型癌中占10%~20%,是男性最常见的癌肿。该病进展缓慢,是威胁50岁以上男性生命的主要癌症,在西方国家占男性死亡率的第二位。美国FDA已批准将PSA检测作为50岁以上男性的普查指标。
流行病学调查表明,随着我国居民生活水平的改善,环境污染的加剧以及饮食结构的改变,前列腺癌的发病率日趋上升,已引起临床上的高度重视。;PSA的表达及生物学特性;2.PSA为单链糖蛋白,分子量为32~34Kd,由237个氨基酸残基组成。编码PSA的mRNA全长为1729bp。PSA为一种中性丝氨酸蛋白激酶,有酶的活性,但活性水平较低,能溶解精液中的蛋白质,在精囊包的分裂和精液的液化上发挥生理作用。PSA能刺激前列腺癌细胞产生活性氧,该效应有浓度依赖性,PSA浓度愈高,刺激作用愈明显,而抗PSA抗体可抑制PSA的刺激作用。F-PSA在血液中的半衰期为110min,而TPSA的半衰期则为2~3d。;3.结构与表达PSA是人类组织激肽释放酶基因家族的一个成员,位于染色体19q13.4上。人类组织激肽释放酶已被识别的有三个:hK1(胰、肾激肽释放酶),hK2(腺体激肽释放酶),hK3(PSA)。人类基因组序列测定显示在染色体19q13.3/q13.4上有15个组织激肽释放酶基因,并有相似的氨基酸序列。hK2基因与hK3相邻,基氨基酸序列与PSA有80%同源,它具有胰蛋白酶样活性,在前列腺中也有具分泌功能的上皮组织。hK2在血清中的水平如果升高,前列腺癌的风险也会增加。;4.同构型:PSA在前列腺管腔内可被蛋白酶分裂而变为同构型PSA(PSAisoforms),也可有以proPSA被去顶(truncatedformofproPSA)的形式存在,又叫[-2]pPSA。[-2]pPSA似乎也和前列腺癌有相关性。;PSA在血清中形态
1.非结合形态,即游离PSA(freePSA,FPSA)。2.结合形态PSA在血液中有60-90%与多种内源性蛋白酶抑制物结合形成复合形PSA(C-PSA):
与α1抗糜蛋白酶(α1-antichymotrypsin)结合,称为PSA-ACT,分子量约80-90kda.
与α2巨球蛋白(α2-macroglobulin)结合,称为PSA-AMG,
与蛋白酶C抑制体(proteaseCinhibitor)结合,称为PSA-PCI,
与α1抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin)结合,称为PSA-AAT。;其中,PSA-ACT是血清中C-PSA的主要构成形式,也是目前免疫学方法能测到的主要成分.其它几种结合形式,由于抗原决定部位被掩蔽,不能为检测抗体所识别。
在精液中,PSA还与C蛋白抑制物构成复合物。;二、检测;由于PSA的浓度较低,而且测到的值(绝对值)直接关系到对患者病情的判断,对检测试剂要求稳定性好,也就是重复性要好。但ELISA方法的影响因素比较多,尤其是低浓度标本的OD值容易受操作条件的影响。所以在用ELISA方法作检测的时候,要严格控制实验条件,操作人员要有一定的经验。另外,每块酶标板必须作单独的标准曲线,以保证结果的准确性。对于酶标法,接近本底孔的OD值所算出来的PSA值其准确性已大打折扣。一般来说OD值在0.15以上的结果就比较具有可比性了。按我们的经验,也就是2.0ng/ml以上的结果。;而发光法一般是应用在全自动分析仪上的,准确性和重复性都是比较好的,比较适合于对PSA这样微量又必须定量的指标进行测定。要注意的是,如要对TPSA和FPSA都进行测定的话,应选用同一厂家出厂的产品。不同测定原理的方法(等克分子法或等重量法)所测出的结果,不适宜用来计算F/T比值。即使只对于总PSA,不同厂家的产品因针对的抗原不同,测出的结果也不太适宜用来直接比较。
国外还有一些产品,用金标试纸条作半定量检测,适用于家庭和门诊。但由于结果不太精确,只适合于初筛。;美国临床生化委员会(NationalAcademyofClinicalBiochemistry,NACB)和欧洲肿瘤标志小组(EuropeanGrouponTumourMarkers,EGTM)建议对常规肿瘤标志物测定的变异系数:
批内CV5%,批间CV10%
NCCLS推荐的PSA标准品是由Stanford制备的,由90%的PSA-ACT和10%的F-PSA组成。;PSA检测中应注意的几个问题:
1.检测前准备采集血液标本应在对前列腺作任何疹疗处理之前进行。如已有操作,则须过至少两周后采血。若要测定FPSA,则48小时内应无射精
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