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用事盘用用用用用用7.薄层色谱法
2018/3/2
7.1概述
1.1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一
种天然药物。1965年德国化学家出版了“薄层色
谱法”一书,推动了这一技术的发展。
2.因TLC法设备简单,分析速度快,分离效率
高,结果直观,很快被用作定性和半定量的
方法。
以后发展了薄层色谱光密度扫描仪,和各步
操作的仪器化,并实现了计算机化。
2018/3/2
4.薄层色谱与高效液相色谱的差别(特点)
◆固定相和流动相
TLC——流动相流动靠毛细作用力,
流动相选择较少受限制,固定相不用
再生。而HPLC是在封闭的系统内,
流动相流量靠泵控制,溶剂选择受检
测器限制,固定相需再生。
◆样品处理
TLC要求没有HPLC严格。
2018/3/23
◆色谱分离
TLC可同时分离多个样品,并可采用相同或
不同溶剂进行同向或双相多次展开,通常采
用正相色谱,色谱后衍生化方便。
◆HPLC一次只能分离一个样品,通常采用
反相色谱,色谱后衍生化受限制。
◆对污染物抗受力强
◆TLC——颗粒物质、腐蚀性物质、不
可逆吸附物质均无影响。
◆HPLC——颗粒物质、腐蚀性物质、
不可逆吸附物质均有大的影响。
7.2薄层色谱法的基本原理
◆1.保留参数(R,值)
◆用来表征斑点位置的基本参数是保留因子,
通常称作比移值,用R,表示。
◆R=L/L。,
L。样品
Lr原
W点比
原前沿
点
2018/3/2
注意:
a.同一物质在不同展开方式中得到的比移
值是不相同的。
b.在同样溶剂的重复n次的多次展开后的
比移值(R?),=1-(1-R?)”。
口相对比移值(R
R,测量中一个重要的误差来源是难以确
定溶剂前沿的位置,因此,引入相对比
移值(R)。
R,=L?/L
2018/3/2
2.分离效能参数
态扩散引起的起始斑点半峰宽的影
响引入真实塔板数(n英实)
b?s为样品斑点半峰宽,b,样品起始斑点
半峰宽。
塔板高度h真实=Ls/n真实
2018/3/2
3.容量因子(K)
容量因子:分配达到平衡后,组分在固定相的量(Ws)
与流动相中的量(W)之比。
=K(V?/V)
出在的日定泪的出的的皮比比。
4.分离度
-w-w-W-M
2018/3/28
假定W?=W,=W
mm
另有n=16[L.W]2
√n△R,
MUR
W?+W?
2018/3/2
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