薄层色谱法教学教材演示幻灯片.pdf

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用事盘用用用用用用7.薄层色谱法

2018/3/2

7.1概述

1.1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一

种天然药物。1965年德国化学家出版了“薄层色

谱法”一书,推动了这一技术的发展。

2.因TLC法设备简单,分析速度快,分离效率

高,结果直观,很快被用作定性和半定量的

方法。

以后发展了薄层色谱光密度扫描仪,和各步

操作的仪器化,并实现了计算机化。

2018/3/2

4.薄层色谱与高效液相色谱的差别(特点)

◆固定相和流动相

TLC——流动相流动靠毛细作用力,

流动相选择较少受限制,固定相不用

再生。而HPLC是在封闭的系统内,

流动相流量靠泵控制,溶剂选择受检

测器限制,固定相需再生。

◆样品处理

TLC要求没有HPLC严格。

2018/3/23

◆色谱分离

TLC可同时分离多个样品,并可采用相同或

不同溶剂进行同向或双相多次展开,通常采

用正相色谱,色谱后衍生化方便。

◆HPLC一次只能分离一个样品,通常采用

反相色谱,色谱后衍生化受限制。

◆对污染物抗受力强

◆TLC——颗粒物质、腐蚀性物质、不

可逆吸附物质均无影响。

◆HPLC——颗粒物质、腐蚀性物质、

不可逆吸附物质均有大的影响。

7.2薄层色谱法的基本原理

◆1.保留参数(R,值)

◆用来表征斑点位置的基本参数是保留因子,

通常称作比移值,用R,表示。

◆R=L/L。,

L。样品

Lr原

W点比

原前沿

2018/3/2

注意:

a.同一物质在不同展开方式中得到的比移

值是不相同的。

b.在同样溶剂的重复n次的多次展开后的

比移值(R?),=1-(1-R?)”。

口相对比移值(R

R,测量中一个重要的误差来源是难以确

定溶剂前沿的位置,因此,引入相对比

移值(R)。

R,=L?/L

2018/3/2

2.分离效能参数

态扩散引起的起始斑点半峰宽的影

响引入真实塔板数(n英实)

b?s为样品斑点半峰宽,b,样品起始斑点

半峰宽。

塔板高度h真实=Ls/n真实

2018/3/2

3.容量因子(K)

容量因子:分配达到平衡后,组分在固定相的量(Ws)

与流动相中的量(W)之比。

=K(V?/V)

出在的日定泪的出的的皮比比。

4.分离度

-w-w-W-M

2018/3/28

假定W?=W,=W

mm

另有n=16[L.W]2

√n△R,

MUR

W?+W?

2018/3/2

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