血管组织工程.ppt

3.2.2.1内皮祖细胞(EPCs，endothelialprogenitorcells）EPCs是一群CD34+的细胞，最早由Asahara等从人外周血中分离得到，在体外可以诱导分化为内皮细胞，参与了新生血管的形成。EPCs具有和造血干细胞一些共表达的标志，如:flk-1，Tie-2等，认为二者都源自成血管祖细胞。第31页,共47页，星期六，2024年，5月优点：EPCs具有容易获得和很强的增殖能力缺点：1.体外扩增培养时间较长2.关于EPCs本身的特殊标志，来源较少“不稳定”，有效的分离聚集办法等都还在摸索阶段，而且在一些特定的病理条件下“其表型会发生改变”，3.生物学活性下降第32页,共47页，星期六，2024年，5月光镜下的细胞学形态[A:刚分离的单个核细胞,细胞呈小圆(×40);B:培养4d后的内皮祖细胞细胞变大、透亮度增强、出现梭形细胞(×40);C:培养7d后的内皮祖细胞细胞数量增多,有较多的小杆形细胞和梭形细胞(×40);D:培养7d后的细胞团呈集落样生长(×10)

-----方叶青.外周血内皮祖细胞分离和培养的试验研究第33页,共47页，星期六，2024年，5月3.2.2.2骨髓间充质干细胞（BMSCs,bonemarrowmesenchymalstemcells）间充质细胞(MSC)最初是由Friedenstein发现的一类易贴附于塑料培养板表面的细胞。在机体内MSC存在于许多组织中，尤以骨髓中最多，简单的骨髓穿刺即可获得，不存在组织配型及免疫排斥问题，理论上能分化为所有的间充质组织类型，如:软骨、脂肪、肌肉及肌健等。第34页,共47页，星期六，2024年，5月有研究表明，骨髓间充质干细胞在体外能够分化为血管平滑肌细胞。有文献报道，在血管损伤修复的过程中，骨髓间充质干细胞参与了血管平滑肌层的重建过程。这些为BMSCs诱导分化为血管平滑肌细胞提供了依据，为组织工程血管平滑肌种子细胞提供了选择的可能。第35页,共47页，星期六，2024年，5月4生长因子的引入动物体中存在着大量对于细胞生长、分化、代谢、凋亡进行调控的生长因子(growthfactor)，这些因子对于组织器官正常功能的维持起着至关重要的作用常用的生长因子有成纤维细胞生长因子(FGF)、转化生长因子(TGF-?)、胰岛素样生长因子(IGF)、血小板衍化生长因子(PDGF)、骨形态发生蛋白(BMP)等。第36页,共47页，星期六，2024年，5月第37页,共47页，星期六，2024年，5月在人工合成的高分子和大部分天然高分子材料中，缺乏这些生长因子或者这些生长因子大部分在材料制备过程中遭到了破坏。因此，将生长因子负载到组织工程支架上，也是越来越被关注的问题。第38页,共47页，星期六，2024年，5月在材料中引人生长因子、黏附因子等，可以对细胞生长、分化、增殖起到促进作用在此基础上，可以将表达生长因子的基因片断负载到支架上进行基因治疗第39页,共47页，星期六，2024年，5月5生物反应器生物反应器是指对微生物/动物细胞培养环境和运行参数（如：PH值、温度、压力、营养的供给和废物的移出）进行监测和调控的一种装置。第40页,共47页，星期六，2024年，5月类型搅拌式生物反应器旋转壁式生物反应器中空纤维生物反应器灌流式生物反应器第41页,共47页，星期六，2024年，5月血管生物反应器主要由两部分组成，即反应器部分和控制系统部分，反应器部分由培养室、硅胶管、储液罐组成，它主要用来盛装培养液、提供细胞材料复合物培养的场所及实现对其进行物理刺激；控制系统部分由控制器、蠕动泵、加载装置、以及电磁阀等元器件组成，它完成对反应器的自动控制，其中主要控制物理刺激模式以模拟真实的体内环境。第42页,共47页，星期六，2024年，5月第43页,共47页，星期六，2024年，5月第44页,共47页，星期六，2024年，5月6展望组织工程支架的最终目的是用于临床治疗，因此有必要在设计制备中考虑材料的机械性能提供具有临床使用价值的、有效的组织工程支架，是组织工程材料研究的根