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中医药学报2024年5月第52卷第5期
·30·ActaChineseMedicineandPharmacologyVol.52,No.5,May2024
基于氧化应激探讨疏肝补肾法对卵巢早衰大鼠
颗粒细胞凋亡的影响
1,21,21,2∗
王敏,张斐,王洋
(1.福建中医药大学中医证研究基地,福建福州350122;2.福建中医药大学中医学院,福建福州350122)
摘要目的:探讨疏肝补肾法对卵巢早衰大鼠颗粒细胞凋亡的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机
分为正常组、模型组、柴胡疏肝散合左归饮低剂量组、柴胡疏肝散合左归饮中剂量组、柴胡疏肝散合左归
饮高剂量组、雌激素组,每组8只。除正常组外,其余大鼠腹腔注射环磷酰胺连续15d建立卵巢早衰大
鼠模型,同时采用慢性不可预知温和应激方式建立肝郁证模型,连续21d。造模成功后,柴胡疏肝散合
-1-1-1
左归饮低、中、高剂量组分别灌服柴胡疏肝散合左归饮混悬液3.39g·kg、6.77g·kg、13.55g·kg,
-1
雌激素组灌胃戊酸雌二醇(补佳乐)0.105mg·kg,正常组和模型组灌胃等体积的灭菌水,连续干预3周。
采集阴道脱落细胞监测大鼠动情周期变化,行为学检测肝郁证造模情况,HE染色观察卵巢组织病理学
情况,ELISA法检测血清雌二醇(E)、促卵泡激素(FSH)、抗缪勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)含
2
量,TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡指数,q-PCR和WesternBlot法检测卵巢组织Bcl-2、Bax、活性氧
(ROS)、SOD-2mRNA和蛋白表达量。结果:与正常组相比,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢组织结构
不清晰,颗粒细胞层明显变薄,旷场实验移动总距离和蔗糖水消耗率降低(P0.05,P0.01),血清
FSH水平升高,E、AMH、INHB水平显著降低(P0.01),颗粒细胞凋亡指数升高(P0.01),Bcl-2、
2
SOD-2的mRNA和蛋白表达量降低,Bax的mRNA和蛋白表达量升高,ROS的mRNA表达量升高(P
0.05,P0.01)。与模型组相比,各给药组卵巢组织病理形态和行为学实验结果有所改善,血清FSH水
平降低,E、INHB水平升高(P0.05,P0.01),Bax、ROS的mRNA表达水平降低,柴胡疏肝散合左归
2
饮中、高剂量组和雌激素组颗粒细胞凋亡指数降低(P0.01)、Bcl-2蛋白表达水平升高,柴胡疏肝散
合左归饮高剂量组和雌激素组Bax蛋白表达降低、SOD-2和Bcl-2的mRNA和蛋白表达升高(P
0.05,P0.01)。与柴胡疏肝散合左归饮低剂量组相比,中剂量组INHB水平升高,高剂量组FSH降
低、E升高、SOD-2的蛋白表达升高,中、高剂量组颗粒细胞凋亡指数降低(P0.05,P0.01)。与柴2
胡疏肝散合左归饮中剂量组相比,高剂量组E水平升高、Bax的mRNA表达水平降低(P0.05)。结
2
论:疏肝补肾法可能通过减轻氧化应激而降低颗粒细胞凋亡率,进而改善卵巢功能,且以高剂量组作用
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