色谱分析方法.ppt

关于色谱分析方法主要内容色谱分析法概述色谱法的本质及流程色谱分析法的一般特点色谱基本理论色谱法应用前景展望第2页,共26页，星期六，2024年，5月一、色谱分析法概述色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。

第3页,共26页，星期六，2024年，5月第4页,共26页，星期六，2024年，5月1、色谱方法的分类色谱常见分类如下：用气体作为流动相气相色谱法Gaschromatography(GC)液相色谱法Liquidchromatography(LC)用液体作为流动相A、按两相状态分类：以流动相状态为准划分方法类型第5页,共26页，星期六，2024年，5月等十余种方法。B、按样品组分在两相间分离机理分类:利用组分在流动相和固定相之间的分离原理不同而命名的分类方法。吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法凝胶渗透色谱法离子色谱法超临界流体色谱法???第6页,共26页，星期六，2024年，5月二、色谱法的本质及流程1、?色谱法的本质色谱法的本质在于色谱柱高选择性和高效能的分离作用与高检测技术的结合。第7页,共26页，星期六，2024年，5月混合组分的样品在色谱柱中分离的依据是：同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。第8页,共26页，星期六，2024年，5月2、?色谱方法的装置系统流程色谱方法装置流程图见下图5-记录仪1-流动相及控制装置；2-流动相净化器3-色谱柱4-检测器第9页,共26页，星期六，2024年，5月三、色谱分析法的一般特点高选择性高效能高灵敏性分析速度快不足之处：被分离组分的定性较为困难，需要与其他分析方法利用。第10页,共26页，星期六，2024年，5月四、色谱基本理论1、?色谱图第11页,共26页，星期六，2024年，5月2、色谱图相关名词（色谱）峰（Chromatographic）Peak 色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。峰底Peakbase峰的起点与终点之间连接的直线（见图3中的CD）。峰高（h）PeakHeight峰宽（W）PeakWidth?半高峰宽（Wh/2）PeakWidthathalfheight?峰面积（A）Peakarea峰与峰底之间的面积（见图3中的CHEJDC）。?标准偏差（ɑ）Standarderror0.607倍峰高处所对应峰宽之一半。第12页,共26页，星期六，2024年，5月基线Baseline在正常操作条件下，仅有载气通过检测器系统时所产生的响应信号的曲线。基线漂移Baselinedrift基线随时间定向的缓慢变化。基线噪声（N）Baselinenoise由各种因素所引起的基线波动。等第13页,共26页，星期六，2024年，5月三、色谱基本参数1、?死时间（tM）Deadtime不被固定相滞留的组分，从进样到出峰最大值所需的时间（见图3中的tM）。2、?保留时间（tR）Retentiontime组分从进样到出现峰最大值所需的时间（见图3中的tR）调整保留时间（t’R）Adjustedretentiontime减去死时间的保留时间（见图3中的t‘R）t’R＝tR—.tM3、?死体积（VM）DeadVolume不被固定相滞留的组分，从进样到出现峰最大值所需的载气体积。第14页,共26页，星期六，2024年，5月4、?保留体积（VR）RetentionVolume组分从进样到出现峰最大值所需的载气体积。VR=tR.FCFC－载气流速（ml/min）。5、?柱效能Columeefficiency色谱柱在色谱分离过程中主要由动力学因素（操作参数）所决定的分离效能。通常用理论板高或有效板数表示。 ①、理论板数（n）Numbe