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精品
血液实验室作业指导书
河北省张家口市第二医院检验科
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河北省张家口市第二医院
凝血酶原时间-纤维蛋白原（PT-FIB）测定
1.实验原理
本实验可同时测定凝血酶原时间（PT）和纤维蛋白原（FIB）浓度。
原理：确定量的抗凝血浆（50微升）样本经一定时间加温后，将组织凝血活酶、钙离子加入其中，激活外
源凝血途径，产生纤维蛋白血凝块，通过660nm光照射血浆，测定其凝固过程中90o散射光变化，然后
通过标准曲线求出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
在检测PT的同时，血浆浊度的变化与血浆中FIB的含量成正相关，通过测定凝固终点和起始点光散射强
度的差值，再根据试验前已经做出的由不同已知FIB浓度与相应的光散射差值关系的标准曲线即可推测出
FIB的浓度。
2.标本采集
2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。
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2.23.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml，混匀。
3.标本存放：全血贮存在4～10oC不超过2小时，最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆，此血
浆在室温22～24oC下可存放2小时，在2～4oC可存放4小时，在-20oC可存放2周，长时间保存需
在冰冻条件下，在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时，应将盛血浆的容器置37oC水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化，以免凝血因子消耗，
解冻后立即测试。冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果不准确。
4.标本运输：低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6.实验材料：
6.1每个试剂均购自德国DadeBehringMarburg公司。
1）PT-FIB测定试剂盒（代号P/N:）
兔脑促凝血激酶10mLX8瓶
2）定标血浆CalibrationPlasma（代号P/N）
3）参比液ReferenceEmulsion（代号P/N:9756900）
4）因子稀释液Factordiluent（代号P/N:9757600）
5）正常质控血浆Normalcontrolplasma（代号P/N）
6）低水平质控血浆AbnormalcontrolplasmalevelI/Low（代号P/N:）
7）高水平质控血浆AbnormalcontrolplasmalevelII/High（代号P/N:）
注：促凝血酶原激酶
当用不同的促凝血酶原激酶，或用不同的检测方法（手工、半自动、全自动）做PT测试时，其秒数结果
将会有较显著的差异。而对于口服抗凝药的病人来说，需要一个能进行比较的PT结果。
国际血液血标准委员会（ICSH）及国际血栓与止血委员会（ICTH）建议，根据试剂的ISI值（国际敏感度
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指数）计算INR值（国际标准化比值），并以INR值作为PT的通用结果报告。
根据经验及文献报道，试剂的灵敏度一手测试方法及机器自动化程度的影响。但美国贝克曼库尔特公司提
供的PT-FIB试剂，每一批号都经过了严格的测试，与ICSH及ICTH的参考品有很好的相关性，其ISI值
均注明在试
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