1.3显微镜的使用.ppt

**实验一显微镜的构造和使用

一、目的要求

1、了解显微镜的构造及其维护

2、初步掌握显微镜的使用方法

3、了解植物细胞的基本结构

4、认识纹孔和胞间连丝的形状，并理解其功能

5、学习临时装片技术和方法

二、实验用品和材料

用品（以后各次实验基本相同）：显微镜、扩大镜、镊子、实验剪、解剖针、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、单面刀片、双面刀片、蒸馏水、番红、碘液、70%酒精、醋酸洋红、苏丹Ⅲ等。

实验报告纸及绘图工具自备。

三、实验内容和方法

（一）显微镜的构造

一般光学显微镜的构造包括两大部分，即保证成象的光学系统和用以装置光学系统的机械部分。

1、机械部分

（1）镜座：是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放置稳固。

（2）镜柱：镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。

（3）镜臂：弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，这取放镜体时手握的部位。镜臂的下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。

（4）镜筒：为显微镜上部圆形中空的长筒，其上端放置目镜，下端与物镜转换器相连，并使目镜和物镜的配合保持一定的距离，其作用是保护成象的光路与亮度。

（5）物镜转换器：接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘上有3-4个螺旋圆孔，为安装物镜的部位，当旋动转换器时，物镜即可固定在使用的位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。

（6）载物台：为放置玻片标本的平台，中央有一圆孔，以通过光线。两旁装有压片夹或移动器，可固定玻片标本和移动玻片。

（7）调焦装置：为了得到清晰的物像，必须调节物镜与标本之间的距离，使它与物镜的工作距离相等。这种操作叫调焦。在镜臂两侧有粗、细调焦螺旋各一对，旋转时可使镜筒上升或下降。大的一对是粗调焦螺旋，调动镜筒升降距离大，旋转一周可使镜筒移动2毫米左右。小的一对是细焦螺旋，调动镜筒的升降距离很小，旋转一周可使镜筒移动约0.1毫米。在用低倍物镜观察时，使用粗调焦螺旋；用高倍物镜观察时，用细调焦螺旋。

（8）聚光器调节螺旋：在镜柱的左侧或右侧，旋转它时使聚光器上下移动，以调节光线。

2、光学部分

由成像系统和照明系统组成，成像系统包括物镜和目镜，照明系统包括反光镜和聚光器。

（1）物镜：这是决定显微镜质量的最主要部件，安装在镜筒下端的物镜转换器上，一般有三个放大倍数不同的物镜，即低倍（10×）、高倍（40×）、油镜（100×）。使用油镜时，必须在盖玻片上和聚光器上滴加一滴香柏油（镜油），然后才能使用。

（2）目镜：安装在镜筒上端，它的作用是将物镜所成的像进一步放大，使之便于观察。其上刻有5×、10×、16×等，表示不同放大倍数，可根据当时需要选择使用。目镜内的光栏上可装一段头发，在视野中则为一黑线，叫指针，可以用它指示要观察的部分。

（3）反光镜（反射镜）：是个圆形的两面镜。一面是平面镜，能反光；另一面是凹面镜，兼有反光和汇集光线的作用，可选择使用，反光镜具有能转动的关节，可作各种方向的翻转，面向光源，能将光线反射在聚光器上。

（4）聚光器（或镜）：装在载物台下，由聚光镜（几个凸透镜）和虹彩光圈（可变光栏）等组成。它可将平行的光线汇集成束，集中在一点，以增强被检物件。聚光器可以上下调节，如用高倍镜时，视野范围小，则需上升聚光器，用低倍物镜时，视野范围大，可下降聚光器。

（5）虹彩光圈：装在聚光器内，位于载物台下方，拨动操纵杆，可使光圈扩大或缩小，借以调节通光量。

二、使用显微镜的主要步骤和方法

1、取镜和放置：

按固定编号从柜中提取显微镜木箱，用钥匙打开箱门，从中取出显微镜，取镜时应右手握住镜臂，左手平托镜座，保持镜体直立，不可歪斜。放置桌面时，动作要轻。一般就放在座位左侧，距桌边缘约5-6厘米的地方，以便观察和防止掉落。特别要禁止用单手提着显微镜走，防止目镜从镜筒中滑出。

2、对光：

一般情况下可用由窗口进入室内的散射光（应避用直射阳光），或用日光灯作光源。对光时，先把低倍物镜转到中央，对准载物台上的通光孔，然后用左眼从目镜下注视（左眼不要紧闭）同时，用手转动反光镜，使镜面向着光源。一般用平面镜即可，光弱时可用凹面镜，当光线从反光镜面向上反射入镜筒时，在镜筒内就可以看一个圆形的、明亮的视野，此时再利用聚光镜或虹彩光圈调节光的强度，使视野内的内线既均匀、明亮、又不刺眼。在对光的过程中，要体会反光镜、聚光镜和虹彩光圈在调节光线中的不同作用。

3、低倍镜的使用

观察任何标本，都必须先用低倍镜，因为低倍镜的视野范围大，容易发现目标和确定观察的部位。

（1）放置切片：升高镜筒，把玻片标本放在载物台中央，使材料正对通光孔的中心，然后用压片夹压住载玻片的两端。

（2）调整焦点：两眼从侧面注视物镜，并慢慢按顺时针方向转动粗调焦螺旋，使镜筒徐徐下必至物镜玻片约5毫米