第1讲微生物的利用（选三培优讲义）公开课教案教学设计课件资料.docxVIP

高三培优讲义选择性必修三生物技术与工程

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第1讲微生物的培养与分离

【课程标准】3.1.1阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。

3．1.2阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。

3．1.3举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。

3．1.4概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。

3．1.5概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。

考点一微生物的培养需要适宜条件

(一)培养基1．为目标微生物提供适宜的生长环境

培养基：人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配制的混合养料。

成分

一般都含有水、、氮源、。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求

种类

物

理

性

质

液体培养基

不加凝固剂

工业生产

半固体培养基

加凝固剂，如琼脂

观察微生物的运动及微生物的分类、鉴定

固体培养基

加凝固剂，如琼脂

微生物的分离、鉴定及活菌计数

目

的

用

途

选择培养基

培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长、促进所需要的微生物的生长

特定微生物的培养、分离

(如以尿素作为唯一氮源的尿素培养基)

鉴别培养基

根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品

不同种类的微生物的鉴别

(如尿素培养基中加入)

配制流程

计算→称量→溶化→→分装→加棉塞→包扎→灭菌

细菌培养基

细菌喜荤，培养基中含有较高的，一般用蛋白胨和酵母提取物配制，

加维持一定渗透压，pH一般

霉菌培养基

霉菌喜素，培养基一般用可溶性淀粉加配制或用添加的豆芽汁，

pH一般

MS培养基

由大量元素、微量元素和成分组成,常配成浓度为配方的5-10倍的,用时稀释?

发芽培养基

3000mLMS培养基+含1.5mgBA的溶液+含0.02mgNAA的溶液+30g蔗糖+40g琼脂。

注意:培养基中相对较多,NAA相对较少,促进长出

生根培养基

1000mLMS培养基+含0.38mgNAA的溶液+30g蔗糖+20g琼脂。注意:培养基中无,促进生根?

全营养LB培养基

0.25g蛋白胨,0.12g酵母提取物,0.25gNaCl,0.5g,水25mL

尿素固定培养基

0.025葡萄糖,0.12gNaCl,0.12gK2HPO4,10mL尿素溶液,0.25mg酚红,0.5g琼脂糖,水15mL；加入尿素前的固体培养基用灭菌，尿素溶液用过滤。?

【提醒】培养基中加入的凝固剂，如琼脂，琼脂在培养基中仅作为凝固剂，不能为微生物提供能量和营养。

2．培养基中营养物质的确定方法

(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机物，碳源可由大气中的CO2提供，氮源可由含氮无机盐提供。

(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。

(3)几种微生物的营养和能量来源

微生物

碳源

氮源

能源

蓝细菌

CO2

NHeq\o\al(＋,4)、NOeq\o\al(－,3)等

光能

硝化细菌

CO2

NH3

NH3的氧化

根瘤菌

糖类等有机物

N2

有机物

酵母菌

糖类、蛋白质等有机物

蛋白质等

有机物

【典例1】下表是生物技术实践中5组生物学实验的培养基成分。请回答:

组别

培养基成分

甲

0.5g蛋白胨、0.25g酵母提取物、0.5gNaCl、50mL水、1g琼脂

乙

0.025g葡萄糖、0.12gNaCl、0.12gK2HPO4、10mL尿素溶液、15mL水、0.5g琼脂糖、0.25g酚红

丙

3g蛋白胨、5g酵母提取物、25g甘露醇

丁

3000mLMS培养基、含1.5mgBA的溶液、含0.02mgNAA的溶液、30g蔗糖、40g琼脂、4000mL蒸馏水

戊

1000mLMS培养基、含0.38mgNAA的溶液、30g蔗糖、20g琼脂、2000mL蒸馏水

(1)分离以尿素为氮源的细菌应选用组培养基。