性激素六项的检测和临床应用专家讲座.pptx

性激素六项检测及临床应用

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免疫学检测发展介绍免疫学检测主要是利用抗原和抗体特异性反应进行检测一个伎俩，因为其能够利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示，所以常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。性激素六项的检测和临床应用第2页

免疫学检测发展介绍免疫分析经历了放射免疫检验、荧光免疫检验、酶标免疫检验等不一样时期，化学发光免疫检验是免疫分析发展一个新阶段，它环境保护、快速、准确特点已得到人们普遍认识。

所以化学发光免疫分析是通往免疫检验完美境界必经之路。性激素六项的检测和临床应用第3页

化学发光免疫分析技术原理化学发光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体一个新型标识免疫测定技术。化学发光是在常温下由化学反应产生光发射。其机制为一些化合物（发光剂或发光底物）能够利用一个化学反应产生能量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子激态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时，以发射光子形式释放能量（即发光）。免疫测定(immunoassay)是利用抗原体反应来测定标本中微量物质方法。性激素六项的检测和临床应用第4页

化学发光免疫分析技术原理1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶活性。3.洗涤后加入发光底物，酶促使发光底物发光，经过专用仪器检测光子数量，从而反算出未知抗原或抗体浓度。性激素六项的检测和临床应用第5页

化学发光免疫检测原理在化学发光免疫分析，基本原理同酶联免疫技术(ELISA)，常采取双抗体夹心法、竞争法、等反应模式。性激素六项的检测和临床应用第6页

检测方法比对1、化学发光与酶免对比

2、化学发光与放免对比

3、化学发光与时间分辩荧光检测对比

4、化学发光突出优点性激素六项的检测和临床应用第7页

化学发光与酶免对比酶免原理：1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶活性。3.洗涤后加入酶反应底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物量与标本中受检物质量直接相关，故可依据颜色反应深浅刊物定性或定量分析。化学发光免疫检测灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，兼具ELISA法简便操作方法与较短反应时间。性激素六项的检测和临床应用第8页

化学发光与酶免对比表酶标化学发光测量精度定性/半定量测量定量测量人体伤害底物有致癌性无使用期较短长干扰原因多极少测试项目少多性激素六项的检测和临床应用第9页

化学发光与放免对比放免原理是使用含有放射性I125作标识物，然后用测量射线计数仪放射性（125I）。对环境污染及对身体危害，已经为重视环境保护国家逐步取消。（如整个欧洲仅尚存几个放免试验室）125I半衰期短而造成其试剂使用期短标识物125I稳定性差，造成试剂盒批间、批内变异较大；标准曲线使用期短，必须每次定标，造成浪费。

操作繁琐，出汇报时间长。性激素六项的检测和临床应用第10页

化学发光与放免对比表放免化学发光测量精度较高高人体伤害放射性无使用期较短长干扰原因较多极少测试项目较少多性激素六项的检测和临床应用第11页

化学发光与时间分辨对比时间分辨免疫检测原理和化学发光基本一样，只是标识物改为稀土元素，不用发光底物但需要外在稳定光源照射，光波长产生stoke位移，并有一个时间滞后方便于检测波长改变后光子数量。

1、化学发光成本低于时间分辨荧光免疫分析。

2、化学发光比时间分辨荧光免疫试剂盒更稳定

3、化学发光免疫分析试剂盒对对测试环境条件要求低。

4、化学发光不需要外光源，仪器可靠性更高性激素六项的检测和临床应用第12页

化学发光与时间分辩荧光对比化学发光时间分辩荧光标识物酶-发光底物两级放大稀土离子，如铕稳定性稳定性非常好影响被标识物生物活性与免疫活性灵敏度灵敏稍高于化学发光反应体系靠近中性酸性，易引发蛋白质变性包被技术不透明微量孔壁吸附,提升分析灵敏度,降低本底采取透明微量孔壁吸附，孔壁透明度会引发,本底干扰技术性新技术，很成熟新技术，不成熟干扰原因干扰极小轻易受内外源稀土离子干扰测试项目项目齐全缺乏部分项目。如：贫血（叶酸，铁蛋白，维生素B12）性激素六项的检测和临床应用第13页

化学发光免疫分析优点1．灵敏度高：这是CLIA关键优越性，其灵敏度可达10-16mol/L（RIA为10-12mol/L）。