新生儿先天性梅毒诊断与临床应用.pptx

新生儿先天性梅毒诊断与临床应用

一、TP病原体检测二、TP抗体检测三、TP－DNA检测

先天性梅毒的诊断缺乏金标准，目前国内外多参考2006年美国疾病控制中心(CentersforDiseaseControlandPrevention，CDC)公布的梅毒治疗方案[4]中的这段标准：①母亲为梅毒患者；②有先天性梅毒的临床症状和体征；③从病变部位、胎盘或脐带找到TP或体液抗TP－IgM抗体阳性；④婴儿RPR滴度较母血增高至少4倍。前言

先天性梅毒按临床表现主要分3类：①胎死宫内型：潜伏期梅毒孕妇宫内感染致流产、死胎，胎儿呈浸软状态，全身各脏器有大量TP，此型罕见；②早期胎传梅毒型：出生时或出生4周内出现肝脾肿大、皮疹、黄疸、贫血等症状，此类患儿死亡率高；③晚期胎传梅毒型：出生时或新生儿期无症状和体征，在生后数月至数年出现症状。随着产前常规梅毒血清学筛查的推广，在采取相应的治疗干预后，新生儿先天性梅毒正在更多地以此种无症状形式存在。为此，人们致力于开发早期、敏感、特异的先天性梅毒实验室诊断方法，各种新技术和新方法不断出现，一批极有前途的实验室方法已被运用到先天性梅毒的诊断中。前言

01TP病原体检测

通过对患儿病损处的分泌物直接进行观察，如能观察到TP特征性的形态和运动方式，可直接诊断先天性梅毒阳性，是最准确、特异的诊断方法，但灵敏度较低。TP病原体检测Part011、暗视野显微镜法用暗视野显微镜可直接观察到病灶分泌物中的TP，具有快速、简便和可靠的诊断价值，是常用诊断方法，但由于要求严格的技术和敏感度较低而限制其应用。2、活体组织检查法常用银染色法或荧光抗体染色，用病灶组织中的分泌物进行涂片染色，于普通显微镜或荧光显微镜下可观察到，呈黑褐色。银染色的阳性结果需要谨慎解释，因为类似TP的其他物质易混淆。

TP病原体检测Part013、多功能显微诊断仪一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜，待检标本不需染色及任何加工处理，直接进行观察，具有直接、方便、快速的优点，但整套仪器价格昂贵，难以普及。4、兔睾丸感染试验TP不能在体外培养，只能在活体内繁殖，这种方法利用家兔对TP的易感性，将TP注入兔睾丸内，采用暗视野显微镜观察或荧光显微镜观察有无感染迹象，敏感度和特异度都高，被认为是诊断梅毒的金标准。其不足之处是不同的动物个体对接种的敏感性不一样，而且费用高、检测时间长，目前仅用于保存菌种、传代及科学研究[6]。

02TP抗体检测

1、传统血清学试验TP抗体检测Part02人体感染TP后，一方面对感染损伤的局部组织及TP表面释放的心磷脂类物质发生免疫应答，产生非特异性抗心磷脂类抗体(反应素)；另一方面宿主对TP的外膜脂蛋白、外膜鞘蛋白等抗原发生免疫应答，产生特异性抗体。目前，基于检测这两类抗体而设计的血清学方法是诊断先天性梅毒的主要手段。

初筛试验TP抗体检测Part02初筛试验为TP非特异性抗体血清学试验，检测血清中的抗心磷脂抗体，主要检测方法有性病研究实验室玻片试验(venerealdiseaseresearchlaboratorytest，VDRL)、不加热血清反应素试验(unheatedserumreagintest,USR)、甲苯胺红不加热血清反应素试验(toluidineredunheatedserumtest,TRUST)和快速血浆反应素环状卡片试验(rapidplasmareagincirclecardtest，RPR)等。

TP抗体检测Part02对于TP阳性的新生儿初筛试验可用于滴度分析、疗效观察以及进行母婴滴度比较。CDC规定新生儿出生时的抗心磷脂抗体的滴度大于或等于母亲滴度的4倍时可以诊断为先天性梅毒，但在先天性梅毒确诊患儿中非TP特异性血清学试验滴度大于或等于其母亲滴度的4倍者不到30%。并且很多疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病、活动性肺结核等甚至正常人都能产生抗心磷脂抗体，导致TRUST出现假阳性结果；先天性梅毒患儿常因其他疾病使用青霉素或头孢类抗生素，使TRUST滴度下降甚至转阴，出现假阴性结果。

确认试验TP抗体检测Part02TP进入机体后，机体首先出现的体液免疫应答是产生IgM抗体，然后是IgG抗体。确认试验为TP特异性抗体血清学试验，检测血清中的抗TP特异性抗体，以IgG为主。主要包括荧光密螺旋体抗体吸收试验(Fluorescenttreponemalantibody－absorptiontest，FTA－ABS)、梅毒螺旋体血细胞凝集试验(Treponemapallidumhaemagglutinationassay，TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(Treponemapallidumparticl