核酸定量荧光计校准规范.docx

中华人民共和国地方计量技术规范JJF（冀）3024-2023

核酸定量荧光计校准规范

CalibrationSpecificationforFluorescenceMetersofNucleicAcid

2023-05-31发布2023-07-01实施

河北省市场监督管理局发布

JJF(冀)3024-2023

JJF(冀)3024-2023核酸定量荧光计校准规范

JJF(冀)3024-2023

FluorescenceMetersofNucleicAcid

归口单位：河北省市场监督管理局

起草单位：河北省计量监督检测研究院

北京市计量检测科学研究院

天津计量监督检测科学研究院

本规范委托河北省计量监督检测研究院负责解释

JJF(冀)3024-2023

本规范主要起草人：

刘红彦（河北省计量监督检测研究院）史盼敬（河北省计量监督检测研究院）赵雨佳（北京市计量检测科学研究院）

常子栋（天津计量监督检测科学研究院）参加起草人：

杨迪（河北省计量监督检测研究院）梁亮（北京市计量检测科学研究院）范培蕾（北京市计量检测科学研究院）

JJF(冀)3024-2023

I

目录

引言 （II）

1范围 （1）

2概述 （1）

3计量特性 （1）

4校准条件 （1）

4.1环境条件 （1）

4.2测量标准及其他设备 （1）

5校准项目和校准方法 （2）

5.1示值误差 （2）

5.2测量重复性 （2）

6校准结果表达 （2）

7复校时间间隔 （3）

附录A校准记录格式（推荐） （4）

附录B校准证书内页格式（推荐） （6）

附录C示值误差的不确定度评定示例 （7）

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II

引言

JJF1071-2010《国家计量校准规范编写规则》、JJF1001-2011《通用计量术语及定义》、JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》共同构成支撑本规范制修订工作的基础性系列规范。

本规范的制定，参考了JJF1836-2020《微量分光光度计校准规范》和JJF1828-2020《ATP荧光检测仪校准规范》相关内容。

本规范为首次发布。

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1

核酸定量荧光计校准规范

1范围

本规范适用于测量双链DNA浓度在（10~100）ng/μL范围的非扩增型核酸定量荧光计的校准。

2概述

核酸定量荧光计（以下简称荧光计）的原理是荧光染料和核酸分子特异性结合后在特定波长下发光，发光强度与核酸浓度成正比，根据荧光强度可以推算出样本中的核酸浓度。荧光计由光源、检测仓、控制面板以及数据采集信号处理系统组成

3计量特性

仪器各项计量特性指标见表1。

表1核酸定量荧光计计量特性指标

计量项目

计量特性

示值误差

不超过±20%

测量重复性

≤10%

注：以上计量特性要求是基于双链DNA测量模式得到，仅供参考，不作为判定依据。

4校准条件

4.1环境条件

4.1.1环境温度：（15～30）℃。

4.1.2相对湿度：（15~70）%。

4.1.3供电电源：电压（220±22）V，频率（50±1）Hz。

4.2测量标准及其他设备

4.2.1核酸标准物质：国家有证双链DNA标准物质，浓度（10~100）ng/μL，相对扩展不确定度不超过10%（k=2）。

4.2.2移液器：（1~10）μL、（20~200）μL，经计量检定合格。

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2

5校准项目和校准方法

5.1示值误差

在（10~100）ng/μL浓度范围内，选择高、低两个浓度的国家有证双链DNA标准物质，每种标物检测3次，按照公式（1）计算。

×100%（1）

式中：

ΔX——示值误差，%；

——仪器3次测量值的算术平均值，ng/μL；X0——标准物质的标准值，ng/μL。

5.2测量重复性

选择1种浓度范围在（10~100）ng/μL的国家有证双链DNA标准物质放入仪器检测，该样品重复检测10次，按照公式（2）计算测量重复性。

式中：

RSD——相对标准偏差，%；

——仪器10次测量值的算术平均值，ng/μL；

Xi——单次测定值，ng/μL；n——测定次数；

i——测定的序号，i=1~10