色谱柱使用手册.docx

期望对大家有所帮助，多谢您的扫瞄！

期望对大家有所帮助，多谢您的扫瞄！

10/18

正相、反相和极性胶联柱使用手册

正相、反相和极性胶联柱使用手册分类:质量检验 2024.3.2222:20作者：LAI|评论：0|阅读：146

正相、反相和极性胶联柱使用手册

ChrompackHPLCNormal-,ReversedphaseandPolarbondedcolumns

注意:

此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂〔pH7.0〕或酸性溶剂

〔pH2.0〕会导致柱子损坏。在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。

简介

此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相〔非水〕条件。反相〔C8，C18，ODS，RP-8和RP-18〕通常用于反相条件〔水相〕。极性胶联型〔APS，diol，CN和NH2〕依照顾用目的，可以用于正相和反相条件。建议不要将一个一样的柱子用于差异格外大的条件下，这是由于柱子在特定的条件下，固定相的性质会发生变化，所以在其他的条件下，会影响柱效。也不建议将硅胶柱用在反相条件下或者将方向柱用在正相条件下，这是由于这种过程会发生重复性差的问题〔每一次注射之间和柱与柱之间的比较〕。

色谱柱老化

在开头分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。

在反相条件下老化

要老化这类柱子，首先要使用乙腈或者甲醇淋洗，然后你选用的洗脱液进行平衡。在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗〕。

如果流动相中使用了添加物〔例如缓冲液或离子对试剂〕，建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。缓冲冲洗应当首先以低流速进行，最后再使用正常流速。

在正相条件下老化

柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。柱子的枯燥〔激活〕或润湿〔失活〕可能是需要的。使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。

对于极性键合柱的特殊说明

由于这些柱子可以用于反相或者正相条件，在进行老化以前，一定要首先检查你要使用的淋洗溶剂或洗脱液是否可以与封装在柱子里的溶剂相混溶。如果这些溶剂不能混溶，必须先使用一个合适的缓冲溶剂进行冲洗。

洗脱液

留意第节和第2节。肯定不要使用pH低于2或者高于7的缓冲液，这是由于它

们会转变固定相的性质。极性键合柱最好使用在3到5之间。在使用以前，洗

脱液要进展脱气，以及使用0.5微米的滤膜过滤，以免发生检测和泵送问题。

肯定要在开头使用系统以前检查水溶液中有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会上升到无法承受的水平。

流量和压力

柱内径

柱内径〔毫米〕

流速

〔ml/min〕

最佳

最高

2.0

0.2

1.0

3.0

0.4

2.0

4.6

1.0

4.0

10.0

4.7

18.0

注意：最高压力：不锈钢柱：4500psi；玻璃柱：3000psi

增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。

假设你想更换柱子，，要降低流量至0，等待洗脱液完全流出