(正式版)C-J-T 150-2001 城市供水 致突变物的测定 鼠伤寒沙门氏菌哺乳动物微粒体酶试验.docxVIP

中华人民共和国城镇建设行业标准

CJ/T141～150—2001

城市供水水质检验方法标准及编制说明和研究报告

2001-07-17发布2001-12-01实施

中华人民共和国建设部发布

一、城市供水水质检验方法标准

Standardmethodsfortheexaminationofwaterofurbanwatersupply

CJ/T150—2001

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前言

本标准由建设部标准定额研究所提出。

本标准由建设部给水排水产品标准化技术委员会归口。

本标准由国家城市供水水质监测网天津监测站负责起草。本标准起草人：张旭东、李嫱。

本标准参加验证单位：北京监测站、上海监测站、深圳监测站、武汉监测站、昆明监测站。

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中华人民共和国城镇建设行业标准

城市供水致突变物的测定

鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验CJ/T150-2001

Urbanwatersupply—

Determinationofmutagenesis—

Salmonellatyphimurium/Mammalsmicrosomalenzymetest

1范围

本标准规定了用鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验测定城市供水的致突变性。本标准适用于城市供水及其源水水质致突变性的测定。

本标准规定以2L为接种的最高检测水样体积。

2方法

人工诱变鼠伤寒沙门氏菌突变株(即组氨酸营养缺陷型),在无组氨酸的培养基上不能生长，如受到致突变物的作用，使其基因发生变化而回复突变为原来的野生型，即使在缺乏组氨酸的条件下也能生长(如下图所示)。其中一些致突变物为直接致突变物。另外一些为间接致突变物，即需代谢活化后具有致

突变性。

3试剂和材料

3.1营养肉汤牛肉浸膏蛋白胨

氯化钠蒸馏水

5g10g5g

1000mL

将上述成分混合后，加热溶解，用饱和NaOH溶液调节pH值至7.2,分装于试管中，每管10mL。经121℃高压湿热灭菌20min。4℃冰箱保存，供增菌使用。(保存期7天)

3.2V-B液

柠檬酸(C?H?O,·H?O)

磷酸氢二钾(K?HPO?·3H?O)

磷酸氢铵钠(NaNH?HPO?·4H?O)硫酸镁(MgSO?·7H?O)

蒸馏水

10g

65.5g

17.5g

1.0g

500mL

将上述试剂在少量蒸馏水中溶解后，稀释至500mL。硫酸镁水溶液在最后缓慢加入以防止产生沉淀，经滤纸过滤后，于4C冰箱保存。

3.3底层培养基

中华人民共和国建设部2001-07-17批准2001-12-01实施

CJ/T150—2001

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葡萄糖

20g

V-B液

100mL

琼脂

17g

蒸馏水

900mL

将V-B液用饱和NaOH溶液调节pH值至7.0。另将葡萄糖溶于100mL蒸馏水中(溶液变黄者弃去重配),两者于115℃灭菌10min。琼脂于800mL蒸馏水中煮沸溶化，121℃灭菌20min,待其凉至

80℃左右，将前两者倒人混匀。浇制平板，每皿25mL。

3.40.5mmol/L-组氨酸-0.5mmol/L-生物素溶液

成分

L-组氨酸(FW155.7)

[或L-组氨酸盐酸盐(FW209.63)D-生物素

蒸馏水

混匀溶解，于4℃冰箱中保存。3.50.1mol/L-组氨酸溶液

L-组氨酸(FW155.7)

[或L-组氨酸盐(FW209.63)蒸馏水

混匀溶解，于4℃冰箱中保存。3.6营养琼脂

琼脂

营养肉汤

将琼脂倒入营养肉汤内加热煮沸，用饱和NaOH20min。于4℃冰箱中可保存14天。

3.7H-顶层培养基

琼脂氯化钠蒸馏水

于4℃冰箱中可保存14天。

7.8mg

10.5mg]

12.4mg

100mL

1.56g

2.10g]

100mL

16g

1000mL

溶液调节pH值至7.2～7.4,121C高压灭菌

0.6g

0.5g

100mL

将琼脂和氯化钠溶于蒸馏水中加热煮沸，以每支试管2.5mL分装，加塞，121C高压灭菌20min。于4℃冰箱中可保存14天。

3.8H+顶层培养基

H-顶层培养基100mL

0.1mol/LL-组氨酸溶液10