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分子医学技能-实验二;PCR基本原理及相关知识;KaryMullis;;PCR扩增DNA片段的原理;①变性：加热，模板DNA形成两条单链
②退火：降温，模板单链DNA与引物配对结合
③延伸：在DNA聚合酶及镁离子等存在的条件下，引物3-端向前延伸，合成与模板配对的新链;上述三步为一个循环，经过一个循环DNA量增加一倍。新合成的链又可以成为新一轮循环的模板，经过25-30个循环后目的DNA就可以扩增106~109倍。
通过循环可以提高PCR的特异性。;PCR反应体系的组成及功能;;;;;影响PCR的主要因素;平台效应及其原因;遗传多态现象(geneticpolymorphism)
是指同一交配繁殖群体中存在两种或两种以上遗传变异的类型,其中频率最低的类型并不依靠重复突变维持。
染色体多态现象
蛋白质多态现象
DNA多态现象
;DNA多态现象产生的原因;DNA多态现象的类型;随机扩增多态性DNA标记(RAPD);不同品种鸡基因组的RAPD分析图;关于apoB基因;;实验操作实验分组，认清试剂（每2人一小组，一人做乙肝病毒PCR）
一人做apoBD)?
患者血清40?l+40?lDNA提取液，混匀（2大组做一份）
?
沸水浴10min，10000rpm×5min（离心机的使用）
?
取上清2?l（或阳性血清2?l）加入一PCR反应管
6000rpm×10s，混匀
PCR仪上，93℃×3min预变性(HemaPCR仪的使用与程序设计)?
93℃×45s，55℃×35s，72℃×60s，重复30个循环
?
72℃保温5min，-20℃保存备用
;apoB(用个人基因组DNA为模板）
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