氧化酶活力的测定编制说明.pdfVIP

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《NADH氧化酶活力的测定分光光度法》编制说明

一、工作简况

(一)任务来源

NADH氧化酶(NOX)(E.C.1.6.--)是一类重要的氧化还原酶,

可催化还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化,将分子氧

还原至过氧化氢或水。NADH氧化酶广泛分布于各种具有不同亲源关

系的物种当中,如人类、脊椎动物、植物、细菌以及古细菌中,对维

持生物的正常生理功能有重要作用。NADH氧化酶在工业和医学领域

具有重要的应用价值。在食品工业中,NADH氧化酶可通过减少导致

腐败的微生物的生长来提高食品的保质期,也可用于奶酪和其他乳制

品的生产,改善最终产品的风味和质地。在化学工业中,NADH氧化

酶可作为氧化型辅酶再生的工具,用于手性醇、胺的生产。在医学领

域,NADH氧化酶是一种潜在的抗菌剂,另外其具有抗氧化特性,在

预防和治疗心血管疾病和癌症方面具有潜力。

NADH氧化酶的酶活力是其质量的重要指标之一,鉴于目前我国

并无统一的NADH氧化酶活力测定的方法标准,产品的实际酶活力和

包装标识的酶活力是否一致还缺乏相关的标准进行规范约束和验证,

因此研制NADH氧化酶活力的测定标准将为NADH氧化酶的生产、流

通及监管提供依据,促进我国NADH氧化酶相关的食品工业、化学工

业和医学的健康发展,具有非常重要的现实意义。根据行业的现实需

求,中国标准化研究院于2024年3月提出《NADH氧化酶活力的测定

分光光度法》团体标准计划,并牵头承担标准起草任务。

2024年5月,经中国产学研合作促进会组织专家通过批准立项,

立项名称为《NADH氧化酶活力的测定分光光度法》。

(二)标准的起草单位及起草人

本标准起草单位:

本标准主要起草人:

(三)主要工作过程

1.预阶段

2024年3月至2024年5月标准起草单位组织相关技术人员对

《NADH氧化酶活力的测定分光光度法》标准项目进行了预研,对

NADH氧化酶的活力测定条件进行了摸索,初步确立了NADH氧化酶

活力的测定方法。标准起草组向中国产学研合作促进会提交了标准建

议书与标准草案,进行申报立项。

2.立项阶段

2024年5月,中国产学研合作促进会正式通过本团体标准的立项。

3.起草阶段

针对该标准项目,正式成立了标准起草工作小组,明确了任务要

求,安排了工作进度,根据单位参与的人员的专业、技能、人数将任

务合理分配。依据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准

化文件的结构和起草规则》对标准草案进一步完善的同时,开展技术

指标的实验验证工作。

在此期间,通过线上和线下会议结合的形式开展了3次工作会议。

会议就标准制定的相关问题进行了协商与研究,并对标准的框架及内

容进行了认真研究和讨论。由此形成了最终的《NADH氧化酶活力的

测定分光光度法》团体标准征求意见稿和编制说明。

二、确定标准主要技术内容

(一)标准编制原则

坚持严要求、适宜性与可操作性相结合的原则。严要求即标准的

编制严格遵循GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文

件的结构和起草规则》及相关法规的要求进行;适宜性既要充分考虑

到本行业的发展现状与特点,又要有一个适宜的范围与程度,从而提

高标准贯彻实施的可操作性。

(二)本标准主要技术内容

1.主体内容

本标准的主体内容包括:范围、规范性引用文件、术语和定义、

原理、试剂、仪器设备、试样制备和试验步骤、试验数据处理以及精

密度。

2.范围

本文件描述了测定NADH氧化酶活力的分光光度法。本文件适用

于生化试剂、工业酶制剂中NADH氧化酶活力的测定。

3.规范性引用文件

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

4.术语和定义

对NADH氧化酶活力单位进行了定义,是在30℃、pH7.0的条件

下,每分钟产生1μmolNADH所需的酶量为一个酶活力单位,单位为

U。

5.原理

++

NADH氧化酶催化底物NADH的氧化生成NAD,NAD在340nm

下无吸收,而NAD

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