无病毒植物的培养.pptx

教学目标和要求;

第一节植物病毒危害和培养无病毒植物意义

;一、植物病毒危害;病毒调查;;危害园艺植物病毒数目;如侵染菊花病毒和类病毒有19种之多;4种对草莓生产造成重大影响:

斑驳病毒（SMoV）

草莓黄边病毒（SMYEV）

草莓镶脉病毒（SVBV）

草莓皱缩病毒（SCrV）、;甘薯根腐病.;2.病毒特征及其侵染;３.植株脱病毒意义;甘薯脱毒苗;脱毒区;

第二节脱除植物病毒原理及方法

;1.热处理脱除植物病毒原理;（1）温汤浸渍处理法：将剪下接穗或种植材料，在50℃左右温水中，浸渍3-15分钟至数小时。

（2）热风处理法：让盆载植物在35-40℃高温下生长发育，热处理空气温度应逐步升高，然后到达所需温度，同时必须保持一定湿度和光照，以后可切取处理后新长出枝条作接穗和砧木，或将热处理与组织培养结合效果更加好。

;2、愈伤组织热处理脱毒法

;果树作???：桃(无黄萎病)、苹果(花叶病)、葡萄(扇叶病毒)、甜橙、香蕉、李子、醋栗、梨、树莓、红莓苔子、草莓等。

蔬菜作物：马铃薯、番茄、菠菜。

花卉植物：蔓生长春花、康乃馨、菊花等。

其它植物：曼陀罗等。;

例：烟草愈伤组织兼热处理钝化烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)取得无病毒株效果做法：

;3.低温处理脱出病毒;

二、化学方法

;利用这些化合物处理整株植物去病毒效果虽不理想，但培养离体组织、细胞和原生质体等却可能有良好效果。

如在培养基中加入2—硫尿嘧啶能够除去烟草愈伤组织中PVY病毒，加入放线菌素D能够抑制原生质体中病毒复制等。

;钝化、抑制和去除植物病毒一些化合物;

三、生物学方法

;（2）茎尖培养脱毒苗方法;马铃薯芽;茎尖结构;微茎尖;马铃薯脱毒苗;;康乃馨不一样茎尖培养与康乃馨斑驳病毒脱除情况;(3)茎尖培养法脱除植物病毒技术关键;如：番茄：只能取生长锥或仅带一片叶原基茎

尖进行培养；

撞羽矮牵牛：可取生长锥或带一两片叶原基

茎尖进行培养；

烟草：可取带4片叶原基茎尖进行培养。

利用茎尖堵养法脱除植物病毒时，最好找出茎原基所带叶原基数目与生长点(茎尖)大小相关性，这么在取材时就方便多了。

;茎原基0.05~0.08mm

茎原基带2片叶原基0.1~0.2mm

茎原基带4片叶原基0.3~0.4mm

茎原基带6片叶原基0.6~0.8mm

;②不一样病毒种类在同一个植物中分布部位不一样。;甘薯斑纹花叶病毒、缩叶花叶病毒：

分布于1.0-2.0mm以内茎尖中

羽毛状花叶病毒：

分布于0.3-1.0mm以内茎尖中

马铃薯马铃薯卷叶病毒、Y病毒：

分布于1.0-3.0mm以内茎尖中；

X病毒：分布于0.2-0.5mm以内茎尖

G病毒：分布于0.2-0.3mm以内茎尖

S病毒：0.2mm以下

;2.愈伤组织培养脱毒;愈伤组织脱病毒机理;3.茎尖微体嫁接脱毒;苹果微体嫁接茎尖大小与脱毒成功率;苹果不一样取材时期对微体嫁接成功率影响;苹果微体嫁接茎尖大小与脱毒成功率;试管微体嫁接在果树方面发展最快;(3)茎尖组织培养繁殖结合热处理可产生无病毒植物，所以，许多研究者认为对通常采取嫁接繁殖果树进行试管嫁接是很适宜。

(4)试管微体嫁接除了可培育无病毒植株外，还可处理难以生根园艺植物生根问题和进行嫁接亲和力研究。

;4.珠心胚培养脱毒;①它与合子胚不一样，不是受精产物，而是由体细胞产生，所以含有和母体相同遗传组成；

②与合子胚一样，在珠心胚和植株之间无维管组织连系，所以即使母体植株感染了病毒，珠心胚也是无毒；

③在自然条件下，珠心胚普通都不能发育成熟，只有适时从种子中剥离出来，接种在人工培养基上，珠心胚才能长成植株，而这些植株应该是不带病毒母体无性系。;5.花药培养脱毒;三、分离茎尖培养情况;第三种：是生长过旺，接种后茎尖显著增大，约培养一同后即在茎尖基部产生愈伤组织，但不易见到茎尖伸长，组织颜色也较浇。这是因为培养茎生长素浓度偏高，或光照弱，温度高而造成。为此应将培养材料转入生长素浓度较低培养基中，或降低温度，提升光照强度来处理。不然时间长了愈伤组织会表换生长分