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;1CRISPR-Cas概述;1CRISPR-Cas概述;CRISPR-Cas主要由两局部组成:;1.1CRISPR结构;1.1CRISPR结构;1.2Cas家族;2CRISPR-Cas系统的发现;2CRISPR-Cas系统的发现;2CRISPR-Cas系统的发现;2CRISPR-Cas系统的发现;2CRISPR-Cas系统靶向要求;2CRISPR-Cas系统靶向要求;2CRISPR-Cas系统靶向要求;3CRISPR-Cas系统介导基因修饰;3.1dual-RNA:Cas介导编辑模板替换;3.1dual-RNA:Cas介导编辑模板替换;3.2sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2sg-RNA:Cas介导基因修饰;3.2sg-RNA:Cas介导基因修饰;2021年2月15日在?science?上发表的?MultiplexGenomeEngineeringUsingCRISPR/CasSystems?一文中,作者利用一个包含两个靶向不同基因的spacers的crRNA实现了同时对两个基因进行编辑。;3.3cr-RNA:Cas介导双基因修饰;4CRISPR-Cas系统前景分析;4CRISPR-Cas系统前景分析;4CRISPR-Cas系统前景分析;4CRISPR-Cas系统前景分析;;Doudna和EmmanuelleCharpentier那么分别把工作往前推进了一步,依赖Cas9蛋白的CRISPR系统要比其它CRISPR系统更简单。
Doudna和Charpentier的课题组都必须证明,他们能够非常精确地控制Cas9蛋白的切割位点,确保不会发生脱靶的情况。
Doudna的博士后MartinJinek提出了将tracrRNA和空格RNA组合起来,形成一个所谓的“向导RNA分子〔single-guideRNA〕〞的想法,并且他们课题组已经在去年成功地构建出了好几个这种向导RNA,而且将其与Cas9蛋白混合在一起,成功地对特定的DNA位点进行了切割〔Science,17August2021,p.816〕。;;最近又出现了另外一种基因组改造工具,那就是TALEN人工核酸酶,这是一种比锌指核酸酶更方便的基因组定向改造工具,并且有可能会彻底取代锌指核酸酶〔Science,14December2021,p.1408〕。;
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