柞蚕功能基因研究进展专家讲座.pptx

柞蚕功效基因研究进展

——沈阳农业大学柞蚕研究所刘彦群研究组

汇报人：

刘彦群、李玉萍

.03;一、研究组介绍

二、研究进展

三、当前重点研究工作

;背景：

在家蚕基因组与功效基因组研究取得巨大进展和成功背景下，我们于年组建了柞蚕基因组与功效基因组研究组。;人员：

固定组员已由最初2人增加为6人（刘彦群、李玉萍、夏润玺、王欢、李群、秦利）。

现有硕士6人，今年准备招生4人。包含特种经济动物喂养、动物学两个专业。;研究领域：

（1）以构建柞蚕全长cDNA文库和完成柞蚕转录组信息资源为平台，克隆和判定柞蚕特异基因和主要功效基因；

（2）利用基因组学技术和分子系统学方法，开展柞蚕遗传与进化研究。

;当前负担国家自然科学基金课题：

（1）面上项目（柞蚕蛹滞育解除期高丰度表示KK-42结合蛋白基因功效分析；.01~.12；刘彦群）。

（2）青年科学基金（柞蚕mtDNA控制区遗传多样性与系统进化；.01~.12；刘彦群）。

（3）面上项目（柞蚕神经肽PBAN受体判定及其作用信号转导分析；.01~.12；魏兆军、李玉萍）。;发表论文：

年至今，在《InternationalJournalofBiologicalSciences》、《AnnalsoftheEntomologicalSocietyofAmerica》、《JournalofInsectScience》、《MolecularBiologyReports》、《ActaBiochimicaetBiophysicaSinica》、《蚕业科学》等发表24篇相关论文，包含13篇SCI论文（年1篇；年2篇；年9篇；年已发1篇，已投稿2篇）。;1、柞蚕EST测定与转录组测序

2、柞蚕功效基因克隆

;EST测定：

（1）构建了一个柞蚕全长cDNA文库，为基因克隆奠定了基础；

（2）取得了1500条柞蚕EST，拼接后得到779个一致性序列，被注释一致性序列达533个，未被注释一致性序列达246个；

（3）识别了200个新EST；

（4）取得了313条柞蚕基因全长cDNA序列。;转录组测序：

（1）合作者合肥工业大学魏兆军博士研究组已经利用Solexa技术完成了滞育解除期柞蚕蛹转录组分析。总共取得84322个contig，注释为38438个unigene。

（2）我们正在利用一样技术进行滞育中期蛹转录组分析。仍将进行注定滞育蛹和注定不滞育蛹转录组分析。

（3）意在分??与柞蚕滞育相关基因。;（1）判定了柞蚕KK-42结合蛋白基因，查明其与蛹滞育亲密相关。

（2）判定了烯醇化酶I、II基因。烯醇化酶I基因在温度刺激时是可调。烯醇化酶II基因与生殖相关。

（3）判定了柞蚕溶血磷酯酶基因、长寿基因、肌球蛋白轻链2基因、异常翅节蛋白基因、腺苷酸转移酶基因、延伸引子-1α基因、肌动蛋白基因。;最近，又判定了柞蚕血小板活化因子乙酰水解酶基因、亚精胺合成酶基因、磷酸丝氨酸转氨酶基因、硒磷酸化物合成酶基因、赖氨酰-tRNA合成酶基因、牻牛儿基牻牛儿醇转移酶、NIMA相关激酶基因等，完成了表示模式分析。还分离了4个小分子量热激蛋白基因、1个微卵黄原蛋白基因。相关论文正在整理中。;1、柞蚕蛹滞育相关KK-42结合蛋白基因功效分析

2、利用转录组技术分离柞蚕蛹滞育相关基因;1、KK-42结合蛋白基因功效分析：

（1）咪唑类化合物（KK-42）是一个昆虫生长调整因子，能加紧昆虫（如柞蚕、天蚕、家蚕等）甚至节肢动物（如对虾）幼虫早熟变态；

（2）而且能解除天蚕卵滞育和棉铃虫蛹滞育。我们试验表明，也能解除柞蚕蛹滞育（需要深入重复验证）

;1、KK-42结合蛋白基因功效分析：

（3）KK-42结合蛋白与天蚕卵滞育解除有直接关系(Shimizuetal.,;Yangetal.,)。

（4）表示谱分析表明，柞蚕KK-42结合蛋白基因在4个发育阶段和全部组织器官中均表示，而且与柞蚕蛹滞育亲密相关（滞育期不表示），而且在滞育解除后期高丰度表示。

（5）序列比对和进化分析表明，KK-42结合蛋白含有两个脂肪酶活性功效域，是脂肪酶新组员。;1、KK-42结合蛋白基因功效分析：

（6）将系统研究KK-42处理对柞蚕生长发育影响；

（7）将利用免疫细胞化学技术进行该蛋白亚细胞定位；

（8）在真核细胞中表示后，利用酶学方法对该蛋白可能含有脂肪酶活性进行判定；

（9）利用RNAi技术进行KK-42结合蛋白基因功效分析。;1、KK-42结合蛋白基因功效分析：

（10）该研究工作能