牛血清中纤连蛋白的分离实验方案.pdf

牛血清中纤连蛋白的分别实验方案

大牛血清中纤连蛋白的分别实验方案设计

大牛血清中纤连蛋白的提取：

1、纤连蛋白（FN）的主要性质

纤粘蛋白，又称纤维连结蛋白、粘连蛋白，是一种大分子糖蛋白，分子量约为450KD，拥有多种生物活

性。FN分子在进化过程中守旧性很强，各样动物体液中的FN拥有特别邻近的构造、性质和生物学功能

因此不一样根源的FN能够互相代替使用。FN的好多功能中，最基本最重要的一项为哪一项促使细胞的黏连生长

而细胞的黏连是机体构造得以保持、细胞生长达成的必需条件。所以FN是细胞培育基的重要成分之一。

2、纤粘蛋白提取原理与考证

纤连蛋白分子量为450KD，能够利用300KD的膜包进行超滤，则截留浓缩液主要含纤连蛋白。可是在超滤

前要进过必定的预办理，保证纤连蛋白的纯度最高。

未办理大牛血清

有

原料没库存

依据实质状况用滤布

去大蛋白办理（滤布去蛋白）

进行去大蛋白办理

库存

到位

高速离心（连续流浪心计）随时准备待用2L/min后2天

能够

得到

0.2微米过滤办理能够正常过滤浓缩

液

300KD超滤超滤设施连结正常，随时待用

保存截留浓缩液20~50倍浓缩，玻璃瓶4℃保存存

从浓缩液中检测纤连蛋白百分含量

先将浓缩液按配比加量，频频冻融后察

和总蛋白含量趁便将胎牛血清纤连

看物理性状，无异样后进行下一步实验

蛋白百分含量也进行测定

考证纤连蛋白的细胞实验设计合理的细胞贴壁实验

将胎牛血清中纤连蛋白含量作为参

照进行配比增添