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第3章基因工程
第一节
重组DNA技术的的基本操作工具
我国是棉花生产大国,但棉花植株常会受到棉铃虫的侵袭,使棉花产量减少1/3,甚至绝收。大量施用农药杀虫不仅提高了生产成本,还可能造成农产品和环境的污染。苏云金杆菌可以合成一种抗虫毒素——Bt毒蛋白,如何能培育出具有抗虫性的棉花新品种呢?
杂交育种?诱变育种?可以实现吗?为什么?
杂交育种:同种生物之间进行;
诱变育种:在原有基因基础上发生基因突变,
结果产生新基因——等位基因(不定向)
基因工程育种:克服远缘杂交不亲和的障碍;定向改造生物性状。
目的基因一毒蛋白基因→→棉花细胞→受体细胞
毒蛋白→基因表达产物
毒死害虫
抗虫棉的培育过程
苏云金杆菌
与载体DNA拼接,导入
一、基因工程的概念及解读
1.概念:指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫重组DNA技术。
①别名:重组DNA技术②变异原理:基因重组
③操作对象:基因④操作水平:DNA分子水平
⑤基本过程:剪切→拼接→导入→表达
⑥结果:赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品
⑦优点:克服远缘杂交不亲和障碍、定向改造生物性状
例如:通过转基因技术,可以实现大肠杆菌生产人的胰岛素,在此实例中,目的基因是人胰岛素基因,受体细胞是:大肠杆菌,目的基因的表达产物
是:人胰岛素o
1970年科学家在细
菌中发现了第一个
限制性内切核酸酶
(简称限制酶)。
20世纪70年代初,多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶
被相继发现。
1967年,科学家发现,在细菌拟核DNA之外的质粒有自我复制能力,并可以在细菌细胞间转移。
1944年艾弗里等人证明了
DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。
1961年尼伦伯格和马太
破译了第一个编码氨基酸的密码子。
1958年梅塞尔森和斯塔尔用实验证明了DNA的半保留复制。
1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋
结构模型。
1972年,伯格成功
构建了第一个体外重组DNA分子。
1950年埃特曼发明了一种测定氨基酸序列的方法。
2.基因工程的诞生和发展
二、基因工程的诞生和发展
判一判:基于基因工程相关基础理论的突破和技术的创新,判断下列说法的正误。
1.1953年,沃森和克里克建立了DNA分子双螺旋结构模型,并用实验证明了DMA分子的半保留复制。(X)
2.1970年,在细菌体内发现了第一个限制酶,后来又发现了多种限制酶、DNA连接酶等。(√)
3.1972年,伯格首先在体外进行DNA改造,并构建了第一个体外重组DNA分子。(√)
4.1983年,科学家采用花粉管通道法培育了世界上第一例转基因烟草。(×)
5.1984年,我国科学家朱作言领导的团队培育了世界上第一条转基因鱼。(√)
6.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的。(√)
思考1:为什么不同种生物的基因能拼接在一起?理论基础是什么?
思考2:为什么外源基因在受体细胞内能够成功表达出相应的蛋白质呢?
理论基础是什么?
理论基础
1.DNA的基本组成单位相同(都是四种脱氧核苷酸)2.都遵循碱基互补配对原则
3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构
1.基因是控制生物性状的结构与功能单位2.遗传信息传递都遵循中心法则
3.生物界几乎共用一套遗传密码
理论基础
3.基因工程的理论基础
(1)不同种生物的基因能拼接的理论基础
(2)外源基因在受体细胞内能表达的理论基础
重组DNA
复制
翻译
—→蛋白质
RNA
复制
逆转录
转录
关键步骤三:
抗虫基因导入棉花细胞
棉株细胞
关键步骤—:
抗虫基因从苏云金芽孢杆菌DNA中提取出来
思考3:培育转基因抗虫棉需要哪些关键步骤?
关键步骤二:
抗虫基因与载体“缝合”抗虫棉
T-DNA
Ti质粒
苏云金芽孢杆菌
构建基因表达载体
Bt毒蛋白基因
组织培养
二、重组DNA技术的基本工具
(一)分子手术刀---限制酶
(二)分子缝合针---DNA连接酶
(三)分子运输车---载体
“手术刀”
“缝合针”
“运输车”
(一)限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
1.简称:限制酶
2.来源:原核生物(主)
3.种类:数千种(限制酶不是一种酶,而是一类酶)
4.作用:识别特定核苷酸序列,断开磷酸二酯键₅——专一性5.识别序列:大多数:6个
少数:4
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