发酵学生产菌种的培养与保藏演示文稿.pdf

发酵学生产菌种的培养与保藏演

示文稿

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优选发酵学生产菌种的培养与保

藏

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生产菌种的制备：

即种子制备，是发酵生产的第一道工序。即将保存在砂土管、

冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过

扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的

菌种的过程。

目的：

提供发酵产量高、生产性能稳定、数量充足、未被杂菌污染的

生产用菌种

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v第一节种子制备的过程

v第二节种子质量控制

v第三节种子保藏与复壮

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第一节种子制备的过程

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两个过程：

孢子制备过程－固体培养基上培养孢子，

种子制备过程－液体培养基上培养菌丝。

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一、孢子制备

（一）放线菌孢子的制备

1.一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的

养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨、无机盐

2.C和N源不要太丰富（C约为1%，N约为0.5%）

3.干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。

4.斜面培养温度大多为28℃，少数为37℃。

5.培养时间5~14天。

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一、孢子制备

（二）霉菌孢子的制备

1.霉菌孢子的培养一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等

天然农产品为培养基。

2.霉菌培养温度大多为25~28℃。

3.培养时间4~14天。

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一、孢子制备

（三）细菌孢子的制备

1.一般采用琼脂斜面培养基，碳源限量而氮源丰富，

如牛肉膏、蛋白胨作有机氮源

2.细菌培养温度大多为37℃

少数为28℃。

3.细菌和菌体培养时间1~2天，

可产芽孢的菌则5~10天。

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二、种子制备

是将固体培养基上培养出来的孢子或菌体转入到液体培养基

中培养，使其繁殖成大量菌丝或菌体的过程。

目的：形成一定数量和质量的菌体。

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方法：摇瓶种子制备和种子罐种子制备

摇瓶种子制备：某些孢子发芽和菌丝繁殖速度缓慢的菌种，需将

孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐。培养基要求比较丰富和完

全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。

种子罐种子制备：

一级种子、二级种子……N＋1级发酵

种子罐的级数主要决定于菌种的性质、菌体生长速度、发酵设

备的合理应用。

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ü细菌：生长快，种子用量比例少，级数也较少，

二级发酵。

茄子瓶→种子罐→发酵罐

ü霉菌：生长较慢，如青霉菌，三级发酵

孢子悬浮液→一级种子罐（27˚C,40小时孢

子发芽，产生菌丝）→二级种子罐

27˚C,10~24小时，菌体迅速繁殖，粗壮菌丝

体）→发酵罐

v放线菌：生长更慢，采用四级发酵

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