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对胆红素的再认识--从结构到功能

内容提要p胆红素的新分类法及δ胆红素p胆红素检测的方法及其影响因素p对胆红素功能的新认识

胆红素研究历史1942年，德国化学家HansFisher首次报道了胆红素的化学结构，他对胆红素前体-血胆红素的全合成研究工作使他在1930年获得了诺贝尔化学奖

胆红素的来源和生成部位p来源：一切含血红素的血色蛋白，如血红蛋白、细胞色素和肌红蛋白p生成部位：主要（70%-80%）：衰老的红细胞在肝脏、脾脏和骨髓中的单核-巨噬细胞系统次要（10%-15%）：肝内血色蛋白如P450、B5过氧化氢酶的分解和脾脏、骨髓内未成熟红细胞的分解，亦称旁路胆红素

胆红素的传统分类法p直接反应胆红素(direct-reactingbilirubin）能在水溶液中与重氮磺胺酸直接起反应p间接反应胆红素(indirect-reactingbilirubin)需要诸如乙醇、甲醇、咖啡因、安息香酸钠等促进剂才能与其他试剂反应

血清胆红素的最新分类法pα胆红素/非结合胆红素/游离胆红素unconjugatedbilirubin，Bupβ胆红素/一元葡糖苷酸胆红素monoglucuronidebilirubin，mBcpγ胆红素/二元葡糖苷酸胆红素diglucuronidebilirubin，dBcpδ胆红素/与白蛋白的配合物（共价结合）/胆蛋白Albumin-bilirubincomplex，Bδ※与胆绿素的四种异构体非对应关系:胆红素-Ⅸα,胆绿素-Ⅸβ,胆绿素-Ⅸγ和胆绿素-Ⅸδ

两种分类法的对应关系p间接胆红素（IB）=α胆红素=非结合胆红素p直接胆红素（DB）=结合胆红素+δ胆红素结合胆红素=β胆红素+γ胆红素TB=Bu+mBc+dBc+Bδ

未结合胆红素的结构胆红素线状结构胆红素的X线衍射结构（即顺式或Z型结构）

光照对胆红素结构的影响p胆红素经400～500nm波长的蓝光(绿光)照射后，内侧氢键断开，其1个或2个吡咯环旋转180°，形成3种E构型的异构体，具有水溶性，可从胆汁直接排泻p形成不可逆的环形化合物(环胆红素)，清除很快，T1/为22h,是新生儿黄疸病人光疗后，在十二指肠和尿中排出的主要胆色素p形成几种水溶性的无色产物，产生慢，量小新生儿黄疸光照疗法的分子基础

结合胆红素的结构双葡萄糖醛酸酯占85-90％单葡萄糖醛酸酯占10-15％

胆红素在血液中的存在形式与白蛋白结合p作为运输载体，可以进入血液循环到达肝脏血浆白蛋白浓度：500~700umol/L血浆胆红素浓度：3~17umol/Lp变脂溶性为水溶性，阻止胆红素过进入血脑屏障和透过细胞膜。p松散的结合，非共价结合！

影响胆红素结合白蛋白的因素ppH环境和钙离子p某些阴离子药物：磺胺类抗菌素、巴比妥和水杨酸盐、游离脂肪酸、胆道造影剂等p白蛋白的分子浓度：过低导致结合不牢固！

δ胆红素（胆蛋白）的特性p与白蛋白以酰胺键共价结合，二者不可分解p具有良好的稳定性，半衰期为17-23天p不被肝细胞摄取，不能通过肾小球，不经胆汁排出p85%与重氮试剂呈直接反应p仅用干化学法能检测到，湿化学法检测不到

δ胆红素可能的来源与形成机制p来源：结合胆红素p形成机制：当结合胆红素升高时，超过肾阈值，返流回血液的结合胆红素在非酶促条件下与白蛋白结合形成的产物。胆汁淤积会加快δ胆红素的形成

δ胆红素的结构非酯型

δ胆红素的结构酯型

δ胆红素存在的意义p有助于理解临床其他指标好转但黄疸不退的原因p用测Bc代替传统DB测定，更加直接地了解病情p计算Bδ/TBIL有助于判断恢复期肝病的预后p在正常人以及高Bu病人（新生儿黄疸）中缺乏，仅在那些酯型高胆红素血症的病人血清中被检测到

胆红素的检测方法研究进展p湿化学法：反应均在液体试剂中进行重氮反应法、氧化酶法、化学氧化法p干化学法：反应在干式试剂片上进行，无液体试剂Kodak建立薄膜分析技术(thinfilmanalysis)p其他：高效液相色谱法（HPLC）、分光光度法、荧光探针法、单克隆抗体法、传感器法

重氮法检测胆红素（一）p原理：血清中DB可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素，Bu测定时则要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键，再与重氮试剂反应。（DB包含Bc和大部分Bδ）p种类：改良J-G法、M-E法、P-L法

重氮法检测胆红素（二）p优点：可直接比色，手续简单，易于自动化p缺点：重氮试剂不稳定，须由亚硝酸钠和氨基苯磺酸临时生成；重氮试剂与Bu和Bc的反应特异性不佳，在一定条件下测Bc，一部分Bu参与反应；易受溶血、脂血等因素干扰；胆红素浓度过高时影响准确度（稀释）

氧化酶法