直流电场下细胞生物学行为观测装置制造方法.pdf

直流电场下细胞生物学行为观测装置制造方法

直流电场下细胞生物学行为观测装置制造方法

本发明提供一种直流电场下细胞生物学行为观测装置，用

观测细胞在直流电场下的生物学行为，具有：电场产生部，

细胞承载部，电流监测部，换液部，成像记录部，控制部，

以及复数个盖板，用于调节细胞上方培养基的高度。其中，

细胞承载部中设有观察区和两个相对应的阶梯结构。基底槽

中间区域设有观察区和两个相同的阶梯结构，两个相对应的

阶梯结构被设置在观察区的两侧，阶数为m，在两个阶梯结

构的同一级阶梯之间的距离分别为l1、l2……lm。盖板的数

量为n，宽度分别为w1、w2……wn，对于第i（1≤i＜n）块

盖板，li≤wi≤li+1。本发明能够更加快捷的改变细胞上面

培养基的高度，方便的在实验的同时调节这一高度。

【专利说明】直流电场下细胞生物学行为观测装置

【技术领域】

[0001]本发明涉及细胞生物学领域，尤其涉及细胞的生物学

行为的观测领域。

【背景技术】

[0002]直流电场对组织形成、炎症反应以及神经损伤修复等

均具有影响。因此在体外对细胞进行直流电场下的行为学观

测就成为一种必要的研究手段。

[0003]在直流电场中研究细胞的行为时，需要制作一种特殊

的培养皿，传统的制造方法是先制作一个方形的玻璃井；再

在细胞培养皿底部并排粘上两块盖玻片，两块盖玻片之间留

出一定距离形成通道，用3140硅胶在培养皿底部并排粘上

两块盖玻片，两块盖玻片之间留出一定距离形成通道，用

3140硅胶在培养皿底部沿两块盖眭版的上缘和下缘(通道部

分截断)分别筑二道隔离堤，使电流仅从通道通过；然后将

玻璃井置于通道中，井内加入细胞悬液，待细胞在通道底部

生长后移除玻璃井，在通道顶部、于两块盖玻片之间粘上盖

玻片，形成电流通过空间；瑞在培养皿中加入培养基；最后

盖上培养皿盖，接上琼脂胶盐桥、银-氯化银电极及电源，

置显微镜下进行观察。现有技术中存在的问题是对于同一种

细胞来说需要在多种电流密度的条件下进行实验，只能换一

个不同高度的隔离堤，从而增加或减小通道的高度来达到不

同的电流密度，但是如果将培养好的细胞从一个培养皿移至

另一培养皿中，需要首先将细胞从贴壁的状态消化下来，再

移到另一个培养皿中，在这个过程中，不仅细胞的形态发生

了变化，需要重新贴壁，并且消化的过程本身也对细胞有损

伤，实验条件达不到统一的目的。从前技术中解决这一问题

的办法是将细胞培养在盖玻片上进行观察，移动时将盖玻片

和上面的细胞一起移动到新的培养皿中，但是将细胞取出的

过程不仅容易造成细菌污染，并且由于细胞从培养液的环境

中进入到空气环境中，空气对细胞也会有一些刺激的作用，

因此对细胞的影响很大。另外，由于细胞常常需要在共聚焦

显微镜下面观察，但是将细胞种在单独的盖玻片上会使得共

聚焦显微镜的镜头与细胞之间的距离过大，还会使得共聚焦

显微镜的镜头与细胞之间的阻隔物过多，造成成像不清。

【发明内容】

[0004]本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供

一种可以调节观察室高度的直流电场下细胞生物学行为观

测装置。为了达到以上目的，本发明采用了以下结构:

[0005]〈结构一〉

[0006]本发明提供一种直流电场下细胞生物学行为观测装

置，用于观测细胞在直流电场下的生物学行为，其特征在于，

具有:电场产生部，用于产生直流电场；细胞承载部，用

承载被观察的细胞及其培养基；电流监测部，用于监测通过

培养基的电流；换液部，用于移出培养基，并输入新鲜的细

胞培养基；成像记录部，用于将细胞行为成像并将图像记录；

控制部，用于控制电场产生部、细胞承载部、电流监测部、

换液部以及成像记录部，以及复数个盖板，用于调节细胞上

方培养基的高度。

[0007]其中，细胞承载部中设有观察区和两个相对应的阶梯

结构。基底槽中间区域设有观察区和两个相同的阶梯结构，

两个相对应的阶梯结构被设置在观察区的两侧，阶数为m，

在两个阶梯结构的同一级阶梯之间的距离分别为Ip

I2……lm。盖板的数量为n，宽度分别

为?wn,对于第i(I≤i

[0010]本发明提供一种直流电场下细胞生物学行为观测装

置，用于观测细胞在直流电场下的生物学行为，其特征在于，

具有:电场产生部，用于产生直流电场；细胞承载部，用于

承载被观察的细胞及其培养基；电流监测部，用于监测通过

培养基的电流；换液部，用于移出培养基，并输入新鲜的细

胞培养基；成像记录装置，用于将细胞行为成像并将图像记

录；以及控制部，用于控制电场产生部、细胞承载部、PH监

测部、电流监