- 1、本文档共26页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
PAGE1/NUMPAGES1
苏子蛋白质的生物活性分析
TOC\o1-3\h\z\u
第一部分苏子蛋白质的抗氧化活性分析 2
第二部分苏子蛋白质对心血管系统的保护作用 5
第三部分苏子蛋白质的抗肿瘤活性研究 8
第四部分苏子蛋白质的抗炎作用评估 10
第五部分苏子蛋白质对神经系统的影响 14
第六部分苏子蛋白质的降血糖活性实验 16
第七部分苏子蛋白质的免疫调节功能探究 19
第八部分苏子蛋白质其他生物活性分析 23
第一部分苏子蛋白质的抗氧化活性分析
关键词
关键要点
【抗氧化活性测定】:
1.自由基清除能力:通过DPPH(1,1-二苯基-2-苦肼基)自由基清除率和氢过氧化物自由基清除率评价苏子蛋白质清除自由基的能力。
2.抗氧化酶活性:检测苏子蛋白质中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶的活性,评估其清除活性氧的能力。
3.总抗氧化能力:使用FRAP(铁还原抗氧化能力)和TAC(总抗氧化能力)等试剂盒测定苏子蛋白质的总抗氧化能力,反映其综合的抗氧化保护作用。
【抗氧化机制探究】:
苏子蛋白质的抗氧化活性分析
一、自由基清除能力测定
1、DPPH自由基清除能力测定
*原理:DPPH是一种稳定的自由基,苏子蛋白质与其反应后,DPPH被还原为稳定的对苯二酚,其吸收值在517nm处降低。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.2-2.0mg/mL时,DPPH自由基清除率呈现剂量依赖性增加,最大清除率达92.3%。
2、ABTS自由基清除能力测定
*原理:ABTS是一种水溶性自由基,苏子蛋白质与其反应后,ABTS被还原为稳定的ABTS+,其吸收值在734nm处降低。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.2-1.6mg/mL时,ABTS自由基清除率呈现剂量依赖性增加,最大清除率达84.6%。
二、金属离子螯合能力测定
1、铁离子螯合能力测定
*原理:铁离子与苏子蛋白质发生鳌合,阻止其与邻二氮苯二胺反应,减少蓝紫色的生成。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.1-1.0mg/mL时,铁离子螯合率呈现剂量依赖性增加,最大螯合率达72.8%。
2、铜离子螯合能力测定
*原理:铜离子与苏子蛋白质发生鳌合,阻止其与双缩脲反应,减少紫色生成的吸光度。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.2-2.0mg/mL时,铜离子螯合率呈现剂量依赖性增加,最大螯合率达89.1%。
三、还原能力测定
1、FRAP还原能力测定
*原理:FRAP是一种氧化还原试剂,苏子蛋白质还原FRAP试剂,Fe3+被还原成Fe2+,其吸收值在593nm处增加。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.5-2.5mg/mL时,还原能力呈现剂量依赖性增加,最大吸光度值达1.52。
四、氧化应激防御酶活性分析
1、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定
*原理:SOD将超氧化物阴离子歧化为过氧化氢和氧气,从而抑制硫唑啉蓝的还原。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.2-1.4mg/mL时,SOD活性呈现剂量依赖性增加,最大活性达72.1U/mg。
2、过氧化氢酶(CAT)活性测定
*原理:CAT将过氧化氢分解为水和氧气,其活性通过比色法检测。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.2-1.6mg/mL时,CAT活性呈现剂量依赖性增加,最大活性达58.5U/mg。
3、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定
*原理:GSH-Px利用谷胱甘肽将过氧化氢还原为水和氧气,其活性通过比色法检测。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.1-0.9mg/mL时,GSH-Px活性呈现剂量依赖性增加,最大活性达45.2U/mg。
五、细胞抗氧化活性分析
1、细胞活性测定(CCK-8)
*原理:苏子蛋白质对H2O2诱导的HepG2细胞活性进行保护,CCK-8试剂可检测细胞活性。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.1-0.8mg/mL时,HepG2细胞活性呈现剂量依赖性增加,最大保护率达86.2%。
2、细胞内活性氧(ROS)含量测定
*原理:DCFH-DA进入细胞后被氧化为DCF,其荧光强度反映细胞内ROS含量。
*结果:苏子蛋白质浓度为0.1-0.8mg/mL时,H2O2诱导的HepG2细胞内ROS含量降低,最大抑制率达74.5%。
结论
苏子蛋白质具有显著的抗氧化活性,包括自由基清除能力、金属离子螯合能力、还原能力,以及提升氧化应激防御酶活性。其护细胞作用已在HepG2细胞模型中得到验证,
文档评论(0)