新版实验大肠杆菌的培养和分离.pptxVIP

微生物;单细胞原核，分支状菌丝（基内~、气生~）;单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见，含有一定形态结构子细胞群体（种群）

菌落是判定菌种主要依据;芽孢：细菌休眠体

;结构

异养型，兼性厌氧型，革兰氏阴性(红色)(G-)

物质(元素)组成：CHONPS…;按照微生物对营养物质不一样需求，配制出供其生长繁殖营养基质。;成份;消毒：较为温和方法，如酒精

注：消毒不能杀死芽孢

灭菌：强烈，全部，完全无菌

灭菌消毒技术是微生物相关工作中最普通也是最主要技术。;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min

2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min（牛奶）

3、化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源

4、紫外线消毒（空气）;(2)惯用灭菌方法：;称量-计算-溶化-灭菌-倒平板

灭菌：加上封口膜，用牛皮纸包好放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌，1Kg压力灭菌15Min

;倒平板

;紫外灯，过滤风，酒精灯，酒精棉球

在火焰旁右手3指拿锥形瓶，2指拿封口膜

使锥形瓶瓶口快速经过火焰

左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖

待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置

;从大肠杆菌斜面→锥形瓶中液体培养基

接种好后在37度摇床振荡培养12h

工具：接种环在接种前要灭菌

;分离方法：平板划线分离法

原理：经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作，将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后，能够分离到由一个细胞繁殖而来肉眼可见子细胞群体，这就是菌落。

只能蘸一次、再次划线从上次末端开始、划好倒置培养1-2天、划线末端出现不连续单个菌落

;

;新版实验大肠杆菌的培养和分离;;新版实验大肠杆菌的培养和分离;新版实验大肠杆菌的培养和分离;1.为何在操作第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，依然需要灼烧接种环吗？为何？;2.在灼烧接种环之后，为何要等其冷却后再进行划线？;将单菌落用划线法接种到斜面，37度培养24h后放入4度冰箱保藏;分离另一个方法：稀释涂布平板法;分离另一个方法：稀释涂布平板法