微生物的实验室培养.pptxVIP

微生物的实验室培养;;芽孢;菌落：;菌落;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、

氯霉素、红霉素、庆大霉素;细菌营养类型;了解相关培养基基础知识，进行无菌技术操作，进行微生物培养。;一、基础知识：;2.不一样微生物往往需要采取不一样培养基配方(参考教材附录内容);选择培养基;依据细胞生存所需物质种类和数量，用人工方法模拟合成。

合成培养基主要成份是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。

优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低

缺点：缺乏一些成份，不能完全满足体外细胞生长需要。;天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。

优点：营养成份丰富，培养效果好

缺点：起源受限;成份复杂，影响对一些试验产物提取和试验结果分析;易发生支原体污染;;液体培养基：;固体培养基：菌落，菌苔;4.培养基用途;（二）无菌技术;（１）消毒定义：

利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物过程。区分为高程度消毒（High-levelDisinfection）、中程度消毒（Intermediate-levelDisinfection）、低程度消毒（Low-levelDisinfection）三种方式。;（2）灭菌定义：;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min

2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min

3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源

4、紫外线消毒

……;1、灼烧灭菌

2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。

3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.;最常见灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它能够杀灭全部生物，包含最耐热一些微生物休眠体，同时能够基础保持培养基营养成份不被破坏。

有些玻璃器皿也可采取高温干热灭菌。为了预防杂菌，尤其是空气中杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采取适宜塞子塞口，通常采取棉花塞，也可采取各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气经过，而空气中其它微生物不能经过。

而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为预防空气中微生物污染而设计。;分类;3.微生物试验室培养基础操作程序;1.无菌技术除了用来预防试验室培养物被其它外来微生物污染外，???有什么目标？;三、试验操作;1．计算、称量

2．溶化

3．调pH：pH7．6

4．过滤：这一步能够省去。

5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引发污染。分装三角烧瓶量以不超出三角烧瓶容积二分之一为宜。

6．加塞

7．包扎;8．灭菌:

将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。

9．倒平板:

待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见书本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.

10．无菌检验：

将灭菌培养基放入37℃温室中培养24—48小时，以检验灭菌是否彻底。;倒平板技术;1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来预计培养基温度？;3.平板冷凝后，为何要将平板倒置？;2、纯化大肠杆菌;微生物的实验室培养;;问题讨论;2.在灼烧接种环之后，为何要等其冷却后再进行划线？;微生物的实验室培养;微生物的实验室培养;问题讨论;微生物恒温培养;微生物恒温培养;菌种保留;四、课题结果评价;本课题知识小结:;【典例解析】;例2．下面对发酵工程中灭菌了解不正确是

A.预防杂菌污染B.毁灭杂菌

C.培养基和发酵设备都必须灭菌

D.灭菌必须在接种前;编号