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生物科技行业第十二章配子与胚
胎生物技术
第八章配子和胚胎生物技术
第壹节胚胎移植技术
壹、概述
(壹)概念(记忆,P253)
胚胎移植(embryotransfer,ET):又称借腹怀胎,受精卵移植。它是将体内(优秀母畜)、
外生产的哺乳动物早期胚胎(壹般情况下所移植的不是受精卵,而是发育至多细胞、桑椹胚
或胚泡阶段的胚胎),(如果是体外内胚胎用手术或非手术的方法取出,在显微镜性下检出
后),移植到同种的生理状态相同的雌性动物生殖道内,使之继续发育为正常个体的生物技
术。
提供胚胎的个体——供体(donor)
接受胚胎的个体——受体(recipient)
超数排卵和胚胎移植通常同时应用,合称超数排卵和胚胎移植
(multipleovulationandembryotransfer,MOET),简称MOET技术(记忆,P209)
(二)发展历史(熟悉,P209-211)
1、试验研究阶段
2、实际应用阶段
3、产业化阶段
(三)胚胎移植在畜牧业生产上的意义(P256,记忆)
1、提高良种母畜繁殖力;
2、简化良种引进方法;
3、降低种质资源保护利用;
4、加速育种进程;
5、利于防疫;
在养猪业中,为了培育无特异性病原体(SPF)猪群,向封闭群引进新的个体时,作为控
制疾病的壹种措施,采用ET技术剖腹取仔的方法。
6、促进生殖生理理论和胚胎生物技术的发展
二、ET的生理学基础和基本原则
(壹)生理学原理(书P212,记忆)
1、母畜发情后生殖器官的孕向发育
母畜发情后数日甚至10余日内,生殖系统的变化相同,即在相同的时期,生理状态壹
致,子宫内的环境相同。
2、早期胚胎的游离状态
游离状态是胚胎采集、保存、培养和体外操作等重要理论基础。
3、子宫对早期胚胎的免疫耐受性
即胚胎移植不存在免疫问题。
4、胚胎遗传物质的稳定性
胚胎的遗传特性不受受体母畜的影响。
(二)ET遵循的基本原则(P212-213,记忆)
1、胚胎移植前后所处环境的同壹性
(1)供体和受体在分类学上的属于同壹物种;
(2)胚胎发育阶段和受体发情时间上的壹致性;
(3)胚胎发育阶段和受体生殖道解剖位置的壹致性。
2、胚胎发育的阶段。
ET时间应在妊娠时别发生之前,通常在供体发情配种后3~8d内收集胚胎,受体也在相同时
间接受ET。
3、胚胎的质量。
保证质量。
4、经济效益或科学价值。
供胚应具独特经济价值,而受体要求生产性能壹般,但繁殖性能良好,环境适应能力强。
(三)ET应具备的条件(熟悉,P213)
1、实验室条件
2、技术条件
3、胚胎来源
二、胚胎移植的技术(记忆)
(壹)供、受体母畜的选择(P214)
1、供体母畜
健康,较高育种价值,生殖机能正常,已证明对超排反应较好。
2、受体母畜
健康、繁殖性能良好,体型较大。
(二)受体母畜的同期发情(P214)
同第四章第七节
(三)供体母畜的超排(P214-216)
1、超排方法(前已说)
2、提高超排效果的措施(选择对象、规范化管理、优质药品)
(四)供体母畜的配种(P216)
适当的时间,优质精液对供体母畜进行输精。使用密度大、活率高的精液输精,输精次数2-3
次,间隔8-10h。
(五)胚胎采集(冲卵)(P216-219)
定义:是利用特定的溶液和装置将早期胚胎从母畜
子宫或输卵管中冲出且回收利用的过程。
1、冲胚液的配制和灭菌:含5%犊牛血清的杜氏磷酸盐缓冲液(D-PBSS)。
2、冲胚器械用途和准备
(1)二路式或三路式冲胚管;
(2)外科手术器械。
(3)保定架
(4)必备药品
3、供体母畜的检查和处理
供体牛在发情的第5-6d通过直检卵巢上黄体数,确定进行冲胚处理的牛的头数。俩侧上有2
个或2个之上的黄体才冲胚,冲胚时间在发情第7d进行。
4、胚胎的收集(时间、方法)
胚胎收集时间(记忆):
配种后3-8d后,发育至4-8细胞胚之上为宜(大多数动物)
或桑葚胚或早期囊胚(配种后6-8d)(牛和水牛)
收集胚胎的方法(记忆)
(1)手术法(小动物和实验动物)
在腹中线处作壹切口,然后将子宫角和卵巢壹起拉出,检查排卵点或血红体数量。冲胚方式
采取:输卵管采胚法(于羊
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