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膝舒胶囊质量标准研究

[摘要]目的：建立膝舒胶囊的定性鉴别和含量测定的方法。方法：用TLC法定性鉴别膝舒胶囊中当归、独活、威灵仙；用HPLC法测定独活中蛇床子素含量。色谱条件为：迪马C18柱；流动相：乙腈一水（48：52）洗脱；检测波长330nm。结果：TLC斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰；蛇床子素进样量在0．0616～0．616~g范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0．9999)；平均回收率为99．83％，RSD为0．51％。结论：所建立的定性、定量分析方法可用于膝舒胶囊的质量控制。

[关键词]膝舒胶囊；质量标准；蛇床子素；当归；独活；威灵仙

膝舒胶囊由狗脊、熟地黄、独活、当归、党参、土鳖虫等九味药材组成，经提取制成的中药复方制剂，具有补肝肾，调气血，通经络，祛寒湿功效，临床用于膝关节退行性骨关节病。为有效监测该制剂的产品质量，我们用薄层色谱法对制剂中的当归、独活、威灵仙进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定独活中的有效成分蛇床子素的含量，所得定性、定量分析方法可客观反映本制剂的内在品质，为该品种的质量控制和评价指标提供理论依据。

1仪器与试药

LC一20A型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；薄层成像色谱仪（瑞土卡玛公司）；AE一240S型电子天平（梅特勒一托利多仪器（上海）有限公司）；KQ一400DB数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）蛇床子素对照品（批号：110822—200407)，供含量测定用；当归对照药材（批号：120927—200613)、独活对照药材（批号：120940—200809)，供鉴别用，均由中国药品生物制品检定所提供；硅胶G预制薄层板（青岛海洋化工有限公司）；膝舒胶囊样品，缺当归、缺独活、缺威灵仙阴性样品（均由本院提供）；试验用乙腈为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2．1当归的薄层鉴别

取本品内容物5g，加90％乙醇50mL，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40mL使溶解，用乙醚提取2次，每次40mL，合并乙醚液，蒸干，残渣用乙酸乙酯1mL使

溶解，作为供试品溶液。另取缺当归阴性样品5g，同法制成缺当归阴性对照溶液。再取当归对照药材1g，加乙醚30mL，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用乙酸乙酯lmL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液、缺当归阴性对照溶液各61xl、对照药材溶液3l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色渚中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。

2．2独活的薄层鉴别

取缺独活阴性样品5g，照当归供试品溶液制备方法制成缺独活阴性对照溶液。另取独活对照药材1g，加乙醚30mL，浸渍过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取当归供试品溶液、缺独活阴性对照溶液、对照药材溶液各5l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一石油醚（60～90℃）一乙酸乙酯（2：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。

2．3威灵仙的薄层鉴别

取本品内容物5g，加70％乙醇50mL，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水40mL使溶解，通过D101型大孔树脂柱（直径1cnl，柱长10cm，湿法装柱），用水80mL洗脱，弃去水洗液，再用50％乙醇60mL洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加水40mL使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次40mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2

次，每次40mL，正丁醇液蒸干，残渣用乙醇2mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺威灵仙阴性样品5g，同法制成缺威灵仙阴性对照溶液。再取威灵仙对照药材3g，加70％乙醇50mL，回流提取1小时，滤过，蒸于，加水40mL使溶解，用乙醚提取2次，每次30mL，弃去乙醚液，挥尽乙醚，通过D101型大孔树脂柱，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各101xL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一甲酸（6：4：0．2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。

2．4含量测定

色谱条件：迪马c色谱柱（250mm×4．6mm，5m)；以乙腈一水（48：52）为流动相，流速为1．0mL／min，检测波长330nm，柱温30℃。理论板数按蛇床子素峰计算应不低于3000。

供试品溶液的制备：取本品内容物适量，研细，取约3g，精密称定，精密加入甲醇4