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消毒质量现场采样与检测方法培训

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消毒质量现场采样及检测方法

谈智

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采样及检测标准

采样时间：消毒处理后，医疗活动前期间

采样后尽快检测，送检时间≤6小时，若样品保留0—4℃，送检时间≤24h

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一、空气

器材：9cm普通营养琼脂平板

方法：平板暴露法（沉降法）

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普通情况：按GB15982-1995医院消毒卫生标准：

布点方法：室内面积≤30m2,设内、中、外对角线三点，内外布点距墙壁1m；室内面积＞30m2，设中央及四角5点，四点布点位置距墙1m，

暴露时间5min

培养时间：48小时

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计算公式：细菌总数（cfu/m3）=50000N/(A×T)

A：平板面积（cm2）T：平板暴露时间N：平均菌落数

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检出限：对于≤30m2房间，假如3块平板共长1个菌，则依据公式，计算结果为52.3报＜53cfu/m3

对于＞30m2房间计算结果为31.4，报＜32cfu/m3

对于洁净度要求高环境，该方法最低检出限与评价标准不一致

GB15928-1995要求Ⅰ类环境≤10cfu/m3

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洁净手术室：依据GB50333-检测

平板沉降方法：沉降时间30min

布点要求及沉降菌标准

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区域

等级

洁净度

布点数

标准（cfu/皿）

尤其洁净手术室

手术区

百级

≥13点

≤0.2

周围区

千级

≥5点

≤0.4

标准洁净手术室

手术区

千级

≥5点

≤0.75

周围区

万级

≥2点

≤1.5

普通洁净手术室

手术区

万级

≥2点

≤2

周围区

十万级

≥2点

≤4

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二、物体表面

1、采样液

对于只清洁、未消毒表面：无菌生理盐水

消毒后物体表面：依据使用消毒剂选择含对应中和剂采取液

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2．采样方法

5cm×5cm标准规格板棉拭采样≥100cm2；

门把手等不规则物体表面：直接涂抹

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3、中和剂选择

消毒剂

中和剂成份

0.5%碘伏

0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80

消毒剂mg/L有效氯

0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80

75%乙醇

0.5%卵磷脂、0.5%吐温80

季铵盐

0.5%卵磷脂、0.5%吐温80

洗必泰

0.5%卵磷脂、0.5%吐温80

2%戊二醛

1%甘氨酸、0.5%吐温80

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4、检测

细菌总数：取1ml接种平皿

金黄色葡萄菌：1ml接种5mlSCDLP液体培养基，36±1℃培养24h，血平板分离

乙型溶血性链球菌：样品1ml接种1%葡萄糖肉汤

沙门氏菌：按照GB4789.41ml加入增菌液中

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四、工作人员手

1．采样液：

无菌生理盐水适合只清洁，未用消毒剂情况

含对应中和剂采样液适合用于消毒后采样

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2．采样方法

被检人员五指并拢，用浸有含对应中和剂无菌洗脱液棉拭子，在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2）并随之转动采样棉拭，剪去操作者手接触部位，将棉拭投入采样液

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五．使用中消毒液

1．采样时间：更换前，使用中消毒液

2．需要检测微生物污染情况：采样液：含对应中和剂营养肉汤，采样方法：取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和剂营养肉汤

3．需要测定含量：另取洁净、干燥采样瓶直接取样

采样量＞100ml要求采样量满足检测需要。

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六、内窥镜

采样依据：内镜清洗消毒技术规范

方法

检测部位：内镜内腔面用无菌注射器抽取10ml含对应中和剂缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口搜集，及时送检，2小时内检测

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检测：

菌落计数：充分振荡，取0.5ml接种2个平皿后倾注营养琼脂，35℃培养48h后计数

致病菌：0.2ml接种血平板

0.2ml接种中国兰平板

0.2ml接种SS平板涂布35℃培养48h

观察有没有致病菌生长

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七．污水

1、检测依据：GB18466-医疗机构水污染排放标准

2、检测项目

余氯检测：现