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定性检测项目室内质控经验交流

定量检测室内质控相对定性检测而言，一般会比较容易上手，很长一段时间都能让质

控保持稳定状态，这是因为定量检测的质控多为纯数据化的格式，有一个确定的数字，处

理起来比较方便，而且定量质控品商业化已经很成熟了，也就是说，在市场上很容易买到

价格实惠，性质稳定的定量质控品，并且还有多个水平的质控品，使用起来就更为全面了。

然而，定性检测就不是那么容易了，定性检测是非“0”即“1”的概念，而且定性检测质

控品水平单一、价格昂贵、稳定性差，而且很难买到，多是与试剂供应商洽谈，由生产厂

家发货，所以这样定性检测质控品就奇货可居了。

质控品来源

我们实验室的免疫ELISA定性质控品也是与试剂供应商洽谈，从试剂生产厂家发货过

来的，成本有点高，出于经济因素，我们都是将到货的质控品及时按用量分装到EP管（子

弹头）中，依温度要求进行冷冻处理，每天拿出需要用的一小支解冻使用。这样就避免了

质控品的反复冻融，防止破坏质控品中蛋白质成份，造成失控。

室内质控品不同于试剂盒中的内部对照品，个别实验室认为试剂盒中内部阴阳对照品

即是室内质控品，这是极其错误的，试剂盒中的内部对照只用于判断每次实验的有效性，

但不能作为室内质控品使用。室内质控品为试剂盒外的外部质控品，是为了监控检测的重

复性而设置的，为了判断本批临床样品检测的有效性，一般要求包括强阳性、弱阳性与阴

性质控血清。但出于各种原因，我们实验室只设置一个弱阳性的外部质控品，数值为试剂

盒Cut-off值的2－3倍。

室内质控品可以购买，也可以自己制备，但正规制备应稳定、无菌，过程比较复杂，

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难度可想而知。有段时间，本实验室严重困难时期，经他人经验交流，用试剂盒中的阴性

对照去稀释阳性对照，使用倍比稀释的方法，配成了弱阳性的室内质控品，数值为Cut-off

值的三倍左右，坚持了一段时间，也还好用，想想，这样的方法还是值得各位考究。

质控品排列顺序

ELISA定性检测时，每次实验必须包含室内质控品与试剂盒内的内部对照品（相同批

号的试剂盒），如果质控品与内部阴阳性对照有一项结果无效，本次实验都需要重新试验。

本实验室ELISA每块板都做一个质控孔，三个阴性对照孔，两个阳性对照孔。注意！是每

块板都做这五个孔，而不是每一批标本只做这五个孔。有人认为一批标本只要做五个孔，

这是不对的，因为每块板之间都有一定的差异性，所以每块板需做质控，这样才是全面合

格的室内质控。质控品孔也应排放在阴阳对照孔的前面，并且要随机放在标本中来做，在

阴阳对照后面才加做质控品孔，这是不对的，因为质控品为一个外部质控，可以把它看成

一个单一的标本，它没有什么特殊性质，要把它当标本做，放在阴阳性对照前面，最好随

机排列，这样才会起到质控的效果。

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质控图参数

最常用的质控图为Leery－Jennings质控图，这也是我们实验室使用的，我相信各

位同仁的实验室用这种质控图的也占大多数。第一次使用质控品，要建立L－J质控图，那

么质控图参数（平均值、标准差、CV）如何获得呢？原则上要求的是连续检测至少20次

得到的数据用来计算参数，不是一天做20多孔质控品，而是每天做一次，连做20多天，

得到的数据来计算参数。出于实际考虑，我们使用的方法是：做5个批次的检测，每个批

次中不少于4个质控血清测定结果，以此来建立一个临时性的均值与标准差，当以达到20

个批次数据后，替代临时性的均值与标准差。这个方法挺好的，我们用过后，效果还可以

的。

变异系数（CV）是反映各次S/C.O.值相对于平均值离散程度的一个指标，用来衡量检

测的重复性或精密度。一般免疫定性的CV不比定量检测CV，相对而言会大一点，波动幅

度大,实验室室内质控CV20%为大多数公认的预期变异，所以实验室CV控制在20%以

内就达到大家公认的标准了。我们实验室一般都控制在15%左右。

质控规则

定性检测质控图也采用“Westgard多规则”，包含六大规则：1、1“警告”规则