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液相色谱方法建立：
样品制备：
??粉碎——提取浸膏——分段——点板——选择流动相
??粉碎——萃取——选择流动相
2.方法建立：
?选择流动相：1?查阅文献
???????2?研究目标物质性质：分子式、官能团
???????3?根据点板或萃取步骤的极性范围
???????4?根据经验（比如先用甲醇水尝试）
?选择色谱柱：1?柱长：一般柱子长相比于短，分离效果更好，但需要的时间将会延长。
??????2?填料粒径：粒径小相对于大，柱效更高，分离效果好，但压力相对高。
??????3?柱子种类：根据流动相或样品选择。
?选择检测器：根据样品选择检测器，常用紫外检测器。如：氨基酸类样品一般可选择蒸发光检测器，请参考文献。
?建立方法：1理论型：研究目标物质的分子性质、判断极性、查阅文献等根据以上研究结果，选择色谱条件后进行尝试经验型：查阅文献开始摸索方法（一般如果文献没有查到特别吻合的，我都是手里有什么柱子，比如C18，直接用甲醇水流动相，先走一下看看）。
?思路如下：
初始方法：选取C18色谱柱，甲醇和水做流动相（使用效果不好再换）梯度洗脱：95%水/5%甲醇——1h后——100%甲醇——所有峰出完为止。
?????2.根据出峰结果进行调整流动相比例（建议初始进样量小，浓度不易过高）如：色谱图中，在45-50min有几个重叠的峰，希望将此处分开。可计算45min和50min的流动相例45min处：95÷60×45=71.25，50min：95÷60×50=79.16调整流动比例：将45min-50分钟流动相比例梯度时间拉长
如调整为：
0-45min甲醇5%-70%
45-60min甲醇70%-80%
60-70min?甲醇80%-100%
直到所有峰出完为止，如达到分离目的，则继续优化，缩短方法时间，提高效率。如调整方法：将45min前和60min后，非目标物质所占用的时间缩短：0-10min甲醇5%-70%
10-25min甲醇70%-80%
25-30min甲醇80%-100%
????30-35min甲醇100%-100%
??根据结果继续优化，当优化到方法稳定，且效率高时，可尝试等度分离，因为等度分离方法相对更加稳定（根据经验，初始尝试条件，可根据梯度洗脱出峰时的浓度减去10%进行尝试，之后再进行调整）。
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