全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座.pptx

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化学发光基本原理反应体系中某种物质分子(反应物、产物、中间体或荧光物质)吸收了反应所释放能量而由基态跃迁至激发态,然后再从激发态返回基态,同时将能量以光辐射形式释放出来,产生化学发光.将化学发光反应应用于分析化学,依据某一时刻发光强度或反应发光总量来确定体系对应组分含量分析方法叫化学发光分析法.全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座第2页

化学发光反应必须具备两个条件一、是该反应能释放出一定能量,且释放出能量能够被某种反应产物或中间体所吸收,使之处于激发态;二、是这种激发态产物应含有一定化学发光量子产率,或者能够将其能量有效地转移给某种荧光物质,产生光辐射.基于此,并不是任何化学反应都能产生化学发光反应,所以,假如测量条件适当,化学发光分析会有足够选择性.全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座第3页

化学发光现象发觉最早发觉化学发光现象发生在生物体内,即荧火虫,现在称之为生物发光(Bioluminescence).到了十九世纪后期人们发觉简单非生物有机化合物也能产生化学发光.1877年,发觉洛汾碱(2,4,5-三苯基咪唑)在碱性介质中被过氧化氢等试剂氧化时发出绿色光.1928年,观察到鲁米诺(3-氨基苯二甲酰肼)在碱性介质中化学发光行为.1935年,第一个汇报了光泽精(N,N-二甲基二吖啶硝酸盐)与过氧化氢反应产生化学发光.到现在吖啶酯、三联吡啶钌等发光标识物应用技术成熟。全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座第4页

化学发光分析法特点因为化学发光分析不使用任何光源,防止了背景光和杂散光干扰,降低了噪声,大大提升了信噪比,因而,化学发光分析法普通都有很高灵敏度,通常可测定纳克级或皮克级化学成份.测量化学发光强度,多采取光电转换装置,用函数统计仪或数显装置,统计化学发光相对强度.以最大发光强度(曲线峰高)定量被测组分浓度.因为流动注射分析(FIA)技术发展,流动注射化学发光仪也广泛使用.配置微机系统,自动进样,储存统计,打印结果,使化学发光分析速度更加快.全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座第5页

化学发光分类化学发光反应参加免疫测定分为二种类型。第一个是以发光剂作为酶免疫测定底物,经过发光反应增强测定敏感性。如:化学发光酶免疫测定(CLEIA,与酶标ELISA法类似,即最终一步酶反应所用底物为发光剂)第二种是以发光剂作为抗体或抗原标识物,直接经过发光反应检测标本中抗原或抗体含量。如:化学发光标识免疫测定亦称化学发光免疫测定(CLIA)、电化学发光免疫测定(ECLI)全自动化学发光免疫分析仪运行原理专家讲座第6页

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