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免疫比浊法检测免疫球蛋白;试验原理;免疫比浊法分类;透射比浊法和散射比浊法光路;(一)基础原理
是个极其简单方法。在抗原过量情况下,与待测样品中对应Ig发生抗原-抗体反应,形成可溶性复合物,使反应介质浊度发生改变。
测量方法利用分光光度计测量被吸收量。读数以吸收单位(A)或OD值表示,A值反应了入射光和透射光比率。待测物中Ig含量可经过标准曲线计算得出。
待测样品中抗原含量与吸光度呈正比,而与透射光呈反比。
反应在PEG作用下,加速复合物形成。;透射比浊法测定原理;样品;透射比浊法缺点:;原理;散射比浊法测定原理;散射光测定;速率散射比浊法
(一)基础原理
;;方法评价:
敏感度高
快速(无须达平衡)
抗原抗体结合动态测定,理论上测定不受本底散射信号影响
可检测微量样品;原理;散射比浊法缺点;影响免疫比浊测定原因;1、透射比浊操作简便,适合用于普通自动生化分析仪和普通分光光度计,几乎全部试验室均能开展。不足是灵敏度和精密度均不够理想,所需抗血清量大,检测周期较长。
2、散射比浊优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定分析仪器,试剂价格高。;免疫浊度法测定中应注意问题
1、伪浊度影响
??????????伪浊度形成原因很复杂,主要是抗血清含有非特异性交叉反应性杂抗体成份;增浊剂浓度和反应时间掌握不妥;样品本身浊度处理不妥;试剂污染和变质;器材尤其是比色杯等不够清洁等原因。
2、非特异性散射光影响
?????免疫浊度法经常受内源性光散射干扰,为防止这些非特异性光散射影响,应用透射比浊法时需确保抗体组分在3%以下,散射比浊法需确保在0.5%以下。??
;本试验中应用聚乙二醇生理特征
聚乙二醇是中性、无毒且含有独特理化性质和良好生物相溶性高分子聚合物,聚乙二醇即PEG含有高度亲水性,在水溶液中有较大水动力学体积,而且没有免疫原性。当藕联到药品分子或药品表面时,能够将其优良性质赋予修饰后药品分子,改变它们在水溶液中生物分配行为和溶解性,在其修饰药品周围产生空间屏障,降低药品酶解,防止在肾脏代谢中很快消除,并使药品能被免疫系统细胞识别。;材料;结果计算方法
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