口腔微生物分子生物学.pptx

口腔微生物分子生物学;第一节分子遗传学基础;一、生命主要遗传物质----DNA;口腔微生物分子生物学;（二）核酸组成、分布及基础化学结构;DNA与RNA区分;（三）DNA结构推衍;口腔微生物分子生物学;口腔微生物分子生物学;二、DNA复制;每一个复制子都含有一个复制起点序列，又称复制原点，也常含有一个末端序列，复制过程在此终止。

复制是在起始阶段控制，一旦开始复制，就会继续进行下去，直到复制完成。;DNA多聚酶种类;（二）DNA复制方式;半保留复制;DNA复制特点;半不连接复制

引导链：5’→3’方向DNA合成

滞后链：3’→5’方向，冈崎片段;口腔微生物分子生物学;三、基因表示;(二)RNA生物合成——转录;2.RNA多聚酶与开启子

开启子：能特异性地与RNA多聚酶

结合，引发RNA合成。

从DNA上特定起始序列（开启子）开始，至终止信号结束;3.转录起始与延伸;4.内含子和外显子概念

原核生物：基因是连续DNA片段

真核生物：基因由若干个不连续DNA片段组成。

内含子：插入序列，它是位于基因内部，能够被转录一段DNA。但在转录后，与之对应那个别转录产物在拼接中被去掉了。

外显子：基因中与成熟mRNA相对应DNA片段，它不但包含蛋白质编码个别，而且包含5’和3’末端不翻译前导序列和尾随序列。;釉原蛋白基因表示示意图;口腔微生物分子生物学;（三）蛋白质生物合成——翻译;1.遗传密码;2.蛋白质生物合成——翻译;Ⅱ.蛋白质合成起始

蛋白质合成在核糖体上进行，核糖体由tRNA和核糖体蛋白质组成。

在细菌中，蛋白质合成第一个氨基酸是甲酰化甲硫氨酸（fMet)。它与对应tRNA结合成甲酰甲硫tRNA，只有它才能识别起始密码并进入核糖体特定部位，从而开启蛋白质合成

AUG→甲酰化甲硫氨酸（fMet);Ⅲ.肽链形成和延伸、合成终止

终止码UAA、UGA、UAG

Ⅳ蛋白质合成终止

终止密码子

;口腔微生物分子生物学;口腔微生物分子生物学;口腔微生物分子生物学;口腔微生物分子生物学;3.新生多肽加工

Ⅰ.fMet水解

Ⅱ.磷酸化、糖基化、甲基化修饰

Ⅲ.信号肽蛋白质向细胞外分泌;四、基因表示;五、基因表示调整;口腔微生物分子生物学;基因表示调控原因??力;基因表示调整方式;基因表示调整方式;负向调整;（1）在无乳糖情况下，调整基因编码阻遏蛋白能够和操纵基因特异性结合，使RNA多聚酶不能结合半乳糖苷酶基因开启子上而无法转录，结构基因就被转录。

（2）看成为诱导物乳糖存在时，乳糖能与阻遏蛋白特意地结合而改变阻遏蛋白构象，使阻遏蛋白不能与操纵基因结合，因而，解除了对结构基因表示抑制，于是β-半乳糖苷酶、半乳糖苷渗透酶、半乳糖苷乙酰化酶等基因被转录，进而翻译。

;结构基因调控有正调控和负调控两类

没有调整蛋白时操纵子内结构基因是开启，而调整蛋白出现后结构基因被关闭。这么调控称为负调控，如乳糖操纵子。

没有调整蛋白时结构基因是关闭，而出现调整蛋白后结构基因转录开启，称为正调控，如阿拉伯糖操纵子。;（二）Britten-Davidson模型

该模型主要假定基因表示得分调整是经过控制系统来调整。

新补充和修改

一个特定激活蛋白能够控制含有对应接收位点许多结构基因表示，即能够控制一组基因表示。

一个结构基因拥有不一样几个接收位点，每个接收位点受一个特异性激活因子识别，这么它能够作为不一样组组员而在不一样情况下表示

基因表示调整能够经过感应位点控制不一样集成基因而到达。;口腔微生物分子生物学;口腔微生物分子生物学;正向调整;原核生物基因表示调整;真核基因生物调整;第二节分子生物学研究主要方法;一、分子克隆材料与方法;（一）限制性内切酶;口腔微生物分子生物学;（二）DNA连接酶;（三）质粒;;;分子克隆中，构建质粒特点;多克隆区

人为构建，便于克隆操作。

含有多个单一限制性内切酶酶切点。

选择因子

含特定基因，如耐抗生素基因或β-半乳糖苷酶基因（lacZ），使克隆后便于挑选。;有质粒载体在其基因组中含有一个大肠杆菌lacZ区段，此区段含有编码β-半乳糖苷酶基因lacZ。在诱导物IPTG（异丙基硫代半乳糖苷）存在下，β-半乳糖苷酶能作用X-gal（5-溴-4-氯-3吲哚-β–D-半乳糖苷）形成蓝色化合物5-溴-4-氯靛蓝。

当这种质粒转化无lacZ基因大肠杆菌时，因为质粒，因为….

;(四)噬菌体;野生λ-噬菌体

线状双链DNA分子

在分子两端各有12个碱基单链互补粘性末端

当λ-噬菌体DNA被注入寄生菌细胞后，会快速经过黏性末端互补作用形成双链环状DNA。

这种由黏性末端形成双链区段，称为COS位