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第二章
核酸结构和功效;核酸(nucleicacid);核酸分类及分布;第一节
核酸化学组成及一级结构
TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid;核酸基本组成单位是核苷酸(nucleotide)。;嘌呤;嘌呤(purine);;;戊糖;碱基和核糖(或脱氧核糖)经过糖苷键连接形成核苷(nucleoside)(或脱氧核苷)。;核苷酸:
AMP,GMP,UMP,CMP
脱氧核苷酸:
dAMP,dGMP,dTMP,dCMP;多磷酸核苷酸:
NMP,NDP,NTP;环化核苷酸:cAMP,cGMP;二、核酸一级结构;5′端;书写方法;;第二节
DNA空间结构与功效DimensionalStructureandFunctionofDNA;一、DNA二级结构
——双螺旋结构;(一)DNA双螺旋结构研究背景;已知核酸化学数据;(二)DNA双螺旋结构模型关键点;碱基平面与纵轴垂直,糖环平面与纵轴平行;3.两条链经过碱基间氢键相连,A对T有两个氢键,C对G有三个氢键,这种A-T、C-G配正确规律,称为碱基互补规则。
4.维持双螺旋稳定原因:横向为氢键,纵向为碱基间堆积力。;碱基互补配对;(三)DNA双螺旋结构多样性;二、DNA超螺旋结构及其在染色质中组装;意义
DNA超螺旋结构整体或局部拓扑学改变及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具相关键作用。;;(三)DNA在真核生物细胞核内组装;串珠状核小体结构;;核小体;三、DNA功效;肺炎双球菌转化试验
OswaldAvery(1944);;;;;第三节
RNA结构与功效;动物细胞内主要RNA种类及功效;一、信使RNA结构与功效;*mRNA结构特点;帽子结构;mRNA核内向胞质转位
mRNA稳定性维系
翻译起始调控;*tRNA一级结构特点
含稀有碱基较多
3′末端为—CCA-OH
5′末端大多数为G
由70~90个核苷酸组成;稀有碱基;*tRNA二级结构
——三叶草形;;*rRNA结构;核糖体组成;四、其它小分子RNA及RNA组学;snmRNAs种类
核内小RNA(snRNA)
核仁小RNA(snoRNA)
胞质小RNA(scRNA)
催化性小RNA
小片段干扰RNA(siRNA);是研究细胞中snmRNAs种类、结构和功效科学。同一生物体内不一样种类细胞、同一细胞在不一样时间、不一样状态下snmRNAs表示含有时间和空间特异性。;核酸理化性质
ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid;一、核酸普通理化性质;;1.DNA或RNA定量
OD260=1.0相当于
50?g/ml双链DNA
40?g/ml单链DNA(或RNA)
20?g/ml寡核苷酸
2.判断核酸样品纯度
DNA纯品:OD260/OD280=1.8
RNA纯品:OD260/OD280=2.0;二、DNA变性(denaturation);;DNA紫外吸收光谱;解链曲线:在连续加热DNA过程中以温度对A260值作图,所得曲线称为解链曲线。;Tm:紫外光吸收值到达最大值50%时温度称为DNA解链温度,又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。其大小与G+C含量成正比。;三、DNA复性与分子杂交
;;变性;核酸分子杂交应用
研究DNA分子中某一个基因位置
定两种核酸分子间序列相同性
检测一些专一序列在待检样品中存在是否
是基因芯片技术基础;第五节
核酸酶
Nuclease;核酸酶是指全部能够水解核酸酶
依据底物不一样分类
DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)
RNA酶(ribonuclease,RNase)
依据切割部位不一样分类
核酸内切酶:
限制性核酸内切酶
非特异性核酸内切酶
核酸外切酶:
5′→3′或3′→5′核酸外切酶。;参加DNA合成与修复及RNA合成后剪接等主要基因复制和基因表示过程
负责去除多出、结构和功效异常核酸,同时也能够去除侵入细胞外源性核酸
在消化液中降解食物中核酸以利吸收
体外重组DNA技术中主要工具酶
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