核酸的结构和功能医学知识专家讲座.pptx

第二章

核酸结构和功效;核酸(nucleicacid);核酸分类及分布;第一节

核酸化学组成及一级结构

TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid;核酸基本组成单位是核苷酸(nucleotide)。;嘌呤;嘌呤(purine);;;戊糖;碱基和核糖（或脱氧核糖）经过糖苷键连接形成核苷(nucleoside)（或脱氧核苷）。;核苷酸：

AMP,GMP,UMP,CMP

脱氧核苷酸：

dAMP,dGMP,dTMP,dCMP;多磷酸核苷酸：

NMP，NDP，NTP;环化核苷酸:cAMP，cGMP;二、核酸一级结构;5′端;书写方法;;第二节

DNA空间结构与功效DimensionalStructureandFunctionofDNA;一、DNA二级结构

——双螺旋结构;（一）DNA双螺旋结构研究背景;已知核酸化学数据;（二）DNA双螺旋结构模型关键点;碱基平面与纵轴垂直，糖环平面与纵轴平行;3.两条链经过碱基间氢键相连，A对T有两个氢键，C对G有三个氢键，这种A-T、C-G配正确规律，称为碱基互补规则。

4.维持双螺旋稳定原因：横向为氢键，纵向为碱基间堆积力。;碱基互补配对;（三）DNA双螺旋结构多样性;二、DNA超螺旋结构及其在染色质中组装;意义

DNA超螺旋结构整体或局部拓扑学改变及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具相关键作用。;;（三）DNA在真核生物细胞核内组装;串珠状核小体结构;;核小体;三、DNA功效;肺炎双球菌转化试验

OswaldAvery(1944);;;;;第三节

RNA结构与功效;动物细胞内主要RNA种类及功效;一、信使RNA结构与功效;*mRNA结构特点;帽子结构;mRNA核内向胞质转位

mRNA稳定性维系

翻译起始调控;*tRNA一级结构特点

含稀有碱基较多

3′末端为—CCA-OH

5′末端大多数为G

由70~90个核苷酸组成;稀有碱基;*tRNA二级结构

——三叶草形;;*rRNA结构;核糖体组成;四、其它小分子RNA及RNA组学;snmRNAs种类

核内小RNA(snRNA)

核仁小RNA(snoRNA)

胞质小RNA(scRNA)

催化性小RNA

小片段干扰RNA(siRNA);是研究细胞中snmRNAs种类、结构和功效科学。同一生物体内不一样种类细胞、同一细胞在不一样时间、不一样状态下snmRNAs表示含有时间和空间特异性。;核酸理化性质

ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid;一、核酸普通理化性质;;1.DNA或RNA定量

OD260=1.0相当于

50?g/ml双链DNA

40?g/ml单链DNA（或RNA）

20?g/ml寡核苷酸

2.判断核酸样品纯度

DNA纯品:OD260/OD280=1.8

RNA纯品:OD260/OD280=2.0;二、DNA变性(denaturation);;DNA紫外吸收光谱;解链曲线：在连续加热DNA过程中以温度对A260值作图，所得曲线称为解链曲线。;Tm：紫外光吸收值到达最大值50%时温度称为DNA解链温度，又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。其大小与G+C含量成正比。;三、DNA复性与分子杂交

;;变性;核酸分子杂交应用

研究DNA分子中某一个基因位置

定两种核酸分子间序列相同性

检测一些专一序列在待检样品中存在是否

是基因芯片技术基础;第五节

核酸酶

Nuclease;核酸酶是指全部能够水解核酸酶

依据底物不一样分类

DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)

RNA酶(ribonuclease,RNase)

依据切割部位不一样分类

核酸内切酶：

限制性核酸内切酶

非特异性核酸内切酶

核酸外切酶：

5′→3′或3′→5′核酸外切酶。;参加DNA合成与修复及RNA合成后剪接等主要基因复制和基因表示过程

负责去除多出、结构和功效异常核酸，同时也能够去除侵入细胞外源性核酸

在消化液中降解食物中核酸以利吸收

体外重组DNA技术中主要工具酶