重组多肽蛋白质类激素药物.pptVIP

长效胰岛素通用的瓶签颜色为蓝色，长效(鱼精蛋白锌胰岛素)：注射后4~6小时起效，高峰浓度4~20小时，持续24~36小时。。预混胰岛素通用的瓶签标志颜色为棕色即将短效与中效预先混合，可一次注射，且起效快(30分钟)，持续时间长达16~20小时。市场常见的有30%短效和70%中效预混，和短、中效各占50%的预混两种。由于此种胰岛素释放呈两相反应。早期快速相，延迟缓慢相，因此也称为两相胰岛素DNA重组技术生产人胰岛素技术路线

A链和B链分别表达法Genetech公司：编码胰岛素A链和B链的核苷序列分别克隆到两个不同的大肠杆菌细胞中，大规模发酵罐中分别培养，纯化后的A链和B链在适宜的氧化条件下共同保温，以促进链间二硫键的形成，最终生成人源化胰岛素（人胰岛素crb）人胰岛素原表达法编码人胰岛素原的核苷序列克隆到大肠杆菌中，并用蛋白水解酶切除胰岛素原的C肽。此方法生产出的制剂叫重组人源化胰岛素。目前根据生产途径不同而有两种生物合成人源化胰岛素：一种为美国生产的，以大肠杆菌为受体菌（人胰岛素prb）；另一为丹麦生产的以酵母菌为受体菌（人胰岛素pyr）。A链和B链同时表达法12、胰岛素的结构修饰（类似物）（1）速效改造Ins的活性形式为单体，但易于聚合，在正常血浆中的浓度约为1×10-9mol/L，并以单体形式存在，在10-3M的浓度下，即发生自身聚合，自趋合作用。单体—自趋合—二聚体—Zn—六聚体（稳定）—解离—单体发挥作用—延长作用时间胰岛素分子间的单—二—多连接点有B8-10、B12～13，B16，B23～B28位的氨基酸，在这些位点用带电氨基酸或大分子氨基酸替代，可以增大胰岛素单体间的电子斥力和空间位阻，从而阻止二聚体或多聚体的形成。这些类似物可以很快由注射处渗透至血液处，因此可以在吃饭时注射，而不必饭前1小时给药。A:B9Ser-Asp,Ｂ27Thr-Glu，使单体带负电荷而自身排斥阻止聚合，主要单体形式存在。B：B28Pro-Asp，以单体或二聚体形式存在。C：B10His-Asp，Ｈis(Zn结合位点)，使Ｚn失去结合位点而无法形成六聚体，主要以二聚体存在。D：B28Pro-Lys,B29Lys-Pro，基于IGFs不易聚合的想法，进行改造．主要以单体形式存在．LysProIns已上市，解聚快，吸收快，但作用时间更短，一般于餐前15分钟或餐前即刻注射，作用类似餐后体内胰岛素释放，用于控制餐后血糖。Ｅ：Ｂ26-30疏水区的缺失，不易形成多聚体，主要以单体形式存在。（2）长效改造A:B27Thr-Arg,A21Asn-Gly作用时间长达35.3hB:使用胰岛素原或其类似物。只有胰岛素7~8%的生物学活性，但它却显著地延长了在血浆中的半衰期。（3）提高生物学活性改造：与胰岛素受体相互作用的氨基酸残基已经被确定，如A1，A5，A19，A21，B10，B16，B23-25，在这些位点上用不同的氨基酸残基所替代的胰岛素类似物可以提高其生物学活性。B10His-谷氨酸，在体外其生物活性高出胰岛素五倍，其它替代氨基酸所对应的胰岛素类似物也具有更高的活性。胰岛素的结构基因：人胰岛素基因位于11号染色体短臂生成：胰岛素生物合成首先在β细胞内粗内质网处合成前胰岛素原(preproinsulin；分子量11500Da)，合成后迅速被微粒体酶裂解为胰岛素原(分子量9000)，胰岛素原进入高尔基体再裂解为胰岛素和C-肽，进入血液循环。胰岛素的结构结构：胰岛素为含51个氨基酸的双链多肽激素，由21个氨基酸残基的A链和30个氨基酸残基的B链组成，链间由两个二硫键连接成三维螺旋结构，单独的胰岛素的A链或B链都没有生物活性。天然人胰岛素的一级结构与牛胰岛素只差3个氨基酸，即A8和B30人为苏氨酸而牛为丙氨酸，A10人为异亮氨酸，牛为缬氨酸；而猪的胰岛素只是B30位与人不同，人为苏氨酸而猪为丙氨酸。胰岛素的结构存在形式：胰岛素在溶液中是单体、二聚体或呈三个二聚体组成的六聚体。胰岛素六聚体含有两分子的Zn2+，以这种形式储存在B细胞的颗粒中，Zn2+在胰岛素晶体形成中发挥作用。用于治疗的高浓度制剂中胰岛素为六聚体，当吸收后浓度降至生理水平时则解离成单聚体，而单聚体是胰岛素的生物活性形式。胰岛素原(proinsulin)：为含86个氨基酸的单链多肽，包含胰岛素A、B链及C-肽链，正常可有少量未被裂解的胰岛素原随同胰岛素及C-肽进入血循环。胰岛素原不经肝清除，主要在肾降解和排出，半衰期为胰岛素的3～4倍，其生理作用相当胰岛素生物活性的7%～8%。C-肽(C-peptide，C-P)：含31个氨基酸，分子量3000。与胰岛素等分子进入血循环