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鸡胚肠上皮细胞分离与传代
材料准备：
培养基和试剂：
DMEM/F12培养基
胎牛血清(FBS)
消化酶(Trypsin-EDTA)
抗生素(Penicillin-Streptomycin)
第一代分离与培养：
鸡胚的获取与处理；从鸡蛋中收集鸡胚（通常在孵化48小时内）。用70%乙醇消毒鸡胚外表面，并在无菌条件下操作。胚胎的分离与组织的解离；将胚胎放入含有灭菌PBS的培养皿中。使用无菌手术刀和镊子小心地将胚胎的肠道分离出来。将分离的肠道组织转移到含有0.25%Trypsin-EDTA消化酶的培养皿中。
细胞的分离和收集；在37°C的培养箱中，将组织和消化酶孵育10-15分钟，使细胞分离。加入足够的DMEM/F12培养基以停止消化过程。通过轻轻的吸力和离心将细胞悬浮物收集到新的培养皿中。
细胞的培养和传代；将细胞悬浮物转移到含有DMEM/F12培养基和10%FBS的新培养皿中。将细胞放入培养箱，维持在37°C和5%CO2下培养。经过几天，细胞将开始贴壁生长。定期观察细胞的形态和密度。
细胞传代
细胞生长达到80-90%的密度；使用0.25%Trypsin-EDTA将细胞从培养皿中解离。
加入足够的培养基以停止消化酶的作用。细胞的传代，将细胞重新分配到新的培养皿中，通常是1:2至1:4的稀释比例。添加新的DMEM/F12培养基和10%FBS以支持细胞的生长和扩增。
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