抗磷脂抗体检测临床应用.pptxVIP

抗磷脂抗体检测

临床应用

一、概述抗磷脂抗体（aPLs）是一组以磷脂和（或）磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体总称。aPLs主要存在于抗磷脂综合征（APS）等自身免疫病患者中，是APS最具特征的实验室指标。aPLs亦是血栓形成和病理妊娠的危险因素。同时，aPLs可见于恶性肿瘤、感染性疾病、某些药物使用后，甚至部分健康人群中亦可出现。狼疮抗凝物（LA）、抗心磷脂抗体（aCL）、抗β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）抗体作为APS分类标准中的实验室指标，目前临床上广泛应用，亦成为临床实验室最为常见的自身抗体检测项目之一。

一、概述aPLs根据靶抗原的特性主要分为：（1）LA：一组能与负电荷磷脂和磷脂蛋白质复合物相结合的免疫球蛋白，主要基于LA在体外能延长磷脂依赖的不同途径的凝血试验时间来进行检测；（2）抗负电荷磷脂抗体：aCL抗体、抗磷脂酰丝氨酸抗体、抗磷脂酸抗体、抗磷脂酰肌醇抗体等；（3）抗中性磷脂抗体：抗磷脂酰胆碱抗体等；

一、概述（4）抗两性磷脂抗体：抗磷脂酰乙醇胺抗体等；（5）抗磷脂结合蛋白抗体：抗β2GPⅠ抗体、抗凝血酶原抗体、抗蛋白C抗体、抗蛋白S抗体、抗膜联蛋白A2抗体、抗膜联蛋白A5抗体等。LA、aCL-IgG、aCL-IgM、抗β2GPⅠ-IgG、抗β2GPⅠ-IgM已作为国际血栓与止血学会(ISTH)2006年修订的APS分类标准中的实验室指标。

二、aPLs检测的临床应用1.APS筛查及诊断：aPLs作为APS特征性的生物学标志物，已成为APS分类标准中的实验室指标。根据国际血栓与止血学会(ISTH)2006年修订的APS分类标准，至少满足1条临床标准和一条实验室标准方可诊断APS，见表1。aPLs与多种分类标准外临床的表现有密切关联，包括血小板减少症、溶血性贫血、肾脏病变（如血栓性微血管病相关肾病、恶性高血压）、心脏瓣膜病变、皮肤病变（如网状青斑、皮肤溃疡）、神经系统病变（偏头痛、舞蹈症、癫痫、原因未明的认知功能障碍）等。

二、aPLs检测的临床应用

二、aPLs检测的临床应用2.血栓及病理妊娠的风险评估：LA、aCL及抗β2GPⅠ抗体的联合检测不仅用于APS的诊断，还有助于APS患者血栓事件再发风险分层。与aCL、抗β2GPⅠ抗体比，LA阳性与血栓、病理妊娠等临床事件有更强的相关性。与aCL-IgM、抗β2GPⅠ-IgM比，aCL-IgG、抗β2GPⅠ-IgG阳性与发生的临床事件相关性更大。LA、aCL、抗β2GPⅠ抗体同时阳性（即3种抗体阳性），与1种或2种自身抗体阳性比，血栓形成或病理妊娠的发生几率更高。

二、aPLs检测的临床应用血栓风险评估：国外已有研究提示，GAPSS（国际APS评分）评分系统[包括高血压1分，高脂血症3分，LA4分，aCL-IgG/IgM5分，抗β2GPⅠ-IgG/IgM4分，抗磷脂酰丝氨酸-凝血酶原复合物抗体（aPS/PT）3分]能有效预测SLE和APS患者血栓再发风险；GAPSS10分为血栓再发高危人群。病理妊娠风险评估：LA、aCL、抗β2GPⅠ抗体同时阳性（即3种抗体阳性），既往明确病理妊娠史，以及合并SLE等其他结缔组织病是APS患者发生病理妊娠的高危因素。

三、aPLs检测（1）筛查试验：包括稀释的蝰蛇毒磷脂时间法（dRVVT）、活化部分凝血活酶时间法（APTT）、硅凝固时间法（SCT）、大斑蛇凝血时间法（TSVT）及蛇静脉酶时间法（ET）等。目前，ISTH、临床实验室标准化协会（CLSI）等国际指南推荐对LA采用2种不同凝血途径的方法进行检测，其中dRVVT和APTT是国际上最常用的检测方法，通常dRVVT作为第一种选择的方法，敏感性较好的APTT（低磷脂或二氧化硅作为活化剂）作为第二种方法。（2）混合试验：将患者血浆与正常血浆（1:1）进行混合，以证实凝血时间延长并不是由于凝血因子缺乏导致。（3）确证试验：采用改变磷脂的浓度或组成来确证LA的存在。LA的相关检测流程，见图1。（一）LA

三、aPLs检测（3）确证试验：采用改变磷脂的浓度或组成来确证LA的存在。LA的相关检测流程，见图1。但在临床实践中，会出现混合试验由于加入正常血浆后引起的稀释作用，从而导致本来弱阳性的LA出现假阴性检测结果，另外亦会由于其他原因引起混合试验的假阴性。因此CLSI提出，对于LA的检测程序为筛查试验-确证试验-混合试验，当筛查试验和确证试验检测结果难以解释时再进行混合试验。（一）LA

三、aPLs检测LA的检测应在抗凝药物治疗前或抗凝药物停用足够时间（至少1周）后采集血液标本。使用0.109mmol/L柠檬酸钠进行抗凝，抗凝剂与血液的比例为1：9。血液标本采集后应及时进行离心（推荐2次离心），以确保离心后血浆中的血小板计数小于10x109/L，确保凝血因子活性。不建议采用过滤法分