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浆膜腔积液
细胞形态学检验
一、引言
浆膜腔积液：是指在疾病情况下,胸腔、腹腔、心包腔及睾丸鞘膜腔内积聚过多液体的总称。浆膜腔积液常规细胞形态学检验与影像学、病理液基等技术一样有着重要的临床意义,能够为临床提供及时的、有效的、全面的诊疗依据,受到临床医生的广泛重视。
计数浆膜腔积液中细胞数量及各类有核细胞所占百分比,准确识别各类细胞、寄生虫、结晶等有形成分,发现细菌和真菌,为疾病的诊断、鉴别诊断、治疗效果和预后评估提供检验依据。
二、标本采集和运送
浆膜腔积液由临床医生采集,建议使用标本专用管(有盖、带刻度、EDTA-K2抗凝剂)采集后加盖,颠倒混匀3~5次,立即送检。
标本留取量至少8~10m1,有形成分较少时可留取50ml标本或多管送检。
标本留取后需要做唯一标识(推荐使用条码标签),至少包括患者姓名、住院号或门诊号及标本类型。
二、标本采集和运送
标本采集后2h内由专人送检,注意生物安全防护,避免溢出。
标本由检验科工作人员接收,核对标本信息、标本种类、标本留取时间,观察标本量是否符合要求,观察标本颜色、性状,以及其它特殊要求是否满足;对于不合格标本,执行标本拒收程序或让步检验。
标本离心前,若手工计数细胞参照临床体液检验技术要求wS/T662-2020施行;仪器计数参照自动化体液分析模式操作要求施行。
三、标本处理
接收后的标本要及时处理,避免细胞及其它有形成分破坏,相对离心力400g,离心时间5~10min;对离心效果不理想的标本,可以先用吸管吸出大部分上清液后再次离心,以达到高度浓缩目的对于血性标本,离心后可以吸取“白膜”层,混匀后再次离心;未能及时处理的标本应放在2~8℃冰箱中储存,不超过48h。
四、制片和染色
制片要求：推片为首选方法,要求片膜的头体、尾层次清晰,薄厚适度;有核细胞数量较少时可制作2张无尾片,以提高阳性率。
（一）制片
四、制片和染色
制片方法：将离心后的标本管缓慢拿出,避免颠倒或晃动,用一次性塑料吸管缓慢吸岀上清液,靠近底部沉淀时可用加样器吸取多余上清液,如底部沉淀量多或比较黏稠,可适当增加上清液残留量。将底部沉渣混匀,取大约10μ1标本滴加在载玻片端,用推片向另一端推制成约2~4cm长度的涂片,推片角度30°~45°,推片时根据沉渣的浊度或黏稠度调整推片角度和速度,浊度或黏稠度较大时,适当降低推片角度和速度;浊度或黏稠度较小时,适当增加推片角度和速度。注意多份标本制片时,推片不能重复使用或清洗后使用,避免交叉污染。
（一）制片
四、制片和染色
注:细胞较少时,可以使用细胞涂片离心机制片。
制片数量：建议制片数量3~5张;如果加做其它染色法,根据标本量的多少增加制片数量,制片结束后,在玻片上注明编号、患者姓名、日期标本种类。
（一）制片
四、制片和染色
常用的染色方法有瑞-姬染色或瑞氏染色,根据鉴别需要加选其它染色。
染色时将自然干燥的涂片水平放置在染片架上进行染色(方法同血涂片),按照瑞-姬染色标本操作程序染色,染色时间5~10min,特殊标本可以镜下观察染色效果。
染好的涂片用流水缓慢冲洗,冲洗时应注意将涂片水平放置在水龙头下小水冲洗,尽量减少染料沉渣沉积,避免流水直接冲洗片膜,将冲洗后的涂片片尾朝上,自然晾干。
（二）染色
五、阅片与细胞分类
阅片：先用低倍镜浏览片尾,必要时浏览全片。了解有无体积较大的细胞或成堆细胞,观察细胞分布与排列,发现其它有价值的有形成分,再用油镜对细胞进行分类。
细胞分类：在涂片染色较好、细胞分布均匀的部位,以“弓”字从片尾到中间的顺序分类计数100~200个有核细胞,分类结果以百分比形式报告。
涂片保存：发出报告后,对涂片进行分类归档,妥善保管,保存时限按各实验室标准操作规程进行处置,一般保存3~5年。
六、报告
有条件的单位推荐出具图文报告,报告包括常规和细胞学两个部分。对化脓性炎症、消化道穿孔、结核性及恶性肿瘤细胞的标本,可先电话通知临床医生,再出具正式报告。
常规部分：包括颜色、透明度、李凡他试验、细胞总数、有核细胞计数及细胞分类计数百分比等。
细胞学部分：包括图像、形态学描述、异常细胞的分级报告、提示或建议等。同时报告其它有形成分,如细菌、真菌、包涵体、寄生虫、结晶、脂肪滴及其它有价值的形态信息。
六、报告
用图像采集系统在镜下选择涂片细胞分布均匀,染色良好的部位,对诊断有价值的细胞或有形成分进行拍摄,选择有代表性的图片。
（一）图像
六、报告
对肿瘤细胞进行必要的形态描述,包括细胞分布、细胞大小、胞质量、胞质内容物、胞质着色、核大小、核形、核染色质排列、核仁数量与大小等。对其它异常细胞或有形成分进行必要的形态学描述。
（二）形态学描述
六、报告
未查见恶性细胞、查见核异质细胞、查见可疑恶性细胞、查见恶性细胞。如果能够确定上皮源性的恶性细胞则报告癌细
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