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人用重组DNA制品质量控制技术指导原则

一、引言

由于分子遗传学、核酸化学及重组DNA(rDNA)技术的迅速发展，现已能

够确定和获得许多天然活性蛋白的编码基因，将其插入表达载体或引入某种宿主

细胞后，能有效地表达该基因产物，再经分离、纯化和检定,可得到用于预防和

治疗某些人类疾病的制品，诸如现有的乙型肝炎疫苗、胰岛素、生长激素、干扰

素等。

用不同于常规方法的rDNA技术生产的制品，是近年来出现的新产品,评

价其安全性和有效性亦不同于常规方法。这一领域中的知识和技术还在不断发

展，为了有利于这类制品在我国的研究和发展，并为这类制品的审评提供依据，

有必要制定一个原则性指导文件,以保证在人群中试验或应用时安全有效。

本“人用重组DNA制品质量控制技术指导原则制品质量控制技术指导原则以下简称《指导原则》）

不可能面面俱到,可能有许多专门技术问题会出现,对于这类问题或某一特定制

品，则应视具体问题具体研究决定。本《指导原则》亦将随科学技术发展和经验

积累而逐步完善.

二、总则

（一）本《指导原则》适用于rDNA技术生产并在人体内应用的蛋白质、

肽类制品.

（二）凡属与一般生物制品有关的质量控制，均按现行版《中国药典》

有关规定执行。有关生产设施的要求应参照国家药品监督管理局《药品生产质量

管理规范》执行。

三、质量控制要求

(一）原材料的控制

1．表达载体和宿主细胞

应提供有关表达载体详细资料，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载

体的构建、结构和遗传特性.应说明载体组成各部分的来源和功能，如复制子和

启动子来源，或抗生素抗性标志物。提供至少包括构建中所用位点的酶切图谱。

应提供宿主细胞的资料，包括细胞株（系）名称、来源、传代历史、检定结果及

基本生物学特性等。

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应详细说明载体引入宿主细胞的方法及载体在宿主细胞内的状态(是否整合到染

色体内)及拷贝数.应提供宿主和载体结合后的遗传稳定性资料。

2．克隆基因的序列

应提供插入基因和表达载体两侧端控制区的核苷酸序列。所有与表达有

关的序列均应详细叙述。

3．表达

应详细叙述在生产过程中,启动和控制克隆基因在宿主细胞中的表达所

采用的方法及表达水平。

4．原辅料

原辅料应按照国家药品监督管理局有关规定执行.动物源性原料的使用

应提供来源及质控检测资料；发酵用培养基不能添加β内酰胺类抗生素。

（二）生产的控制

1．主细胞库(MASTERCELLBANK）

rDNA制品的生产应采用种子批(SEEDLOT）系统。从已建立的主细胞库中，

再进一步建立生产细胞库（WCB）。

含表达载体的宿主细胞应经过克隆而建立主细胞库。在此过程中，在同

一实验室工作区内，不得同时操作两种不同细胞（菌种)；一个工作人员亦不得

同时操作两种不同细胞或菌种。

应详细记述种子材料的来源、方式、保存及预计使用寿命。应提供在保

存和复苏条件下宿主载体表达系统的稳定性证据。采用新的种子批时，应重新作

全面检定。

真核细胞用于生产时，细胞的鉴别标志，如特异性同功酶或免疫学或遗传学特征，

对鉴别所建立的种子是有用的.有关所用传代细胞的致癌性应有详细报告。如采

用微生物培养物为种子，则应叙述其特异表型特征。

一般情况下，在原始种子阶段应确证克隆基因的DNA序列。但在某些情

况下，例如传代细胞基因组中插入多拷贝基因.在此阶段不适合对克隆基因作

DNA序列分析.在此情况下，可采用总细胞DNA的杂交印染分析，或作mRNA的序

列分析。对最终产品的特征鉴定应特别注意.

种子批不应含有外源致癌因子，不应含有感染性外源因子,如细菌、支原

体、真菌及病毒.

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有些细胞株含有某些内源病毒，例如逆转录病毒，且不易除去.但当已确

知在原始细胞库或载体部分中污染此类特定内源因子时，则应能证明在生产纯化

过程可使之灭活或清除.

2．有限代次生产

用于培养和诱导基因产物的材料和方法应有详细资料