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核因子E2相关因子2蛋白通过调控铁死亡介导脓毒

症相关性肝损伤

【摘要】目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白对小鼠脓毒症相关性肝

损伤(SALI)铁死亡的作用。方法按随机数字表法将雄性SD小鼠分成6组，

每组6只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠SALI模型，假手术(Sham)组

仅开腹处理。CLP+Fer-1组、CLP+Erastin组、CLP+ML385组、CLP+Curumin组

分别于术后经腹腔注射铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)10mg•kg-1•d

T、铁死亡激活剂Erastin20mg•kg-1•d~lNrf2抑制剂ML38530mg•k

g-1•d~lNrf2激活剂Curumin100mg•kg-1•d-1进干预；Sham组、C

LP组予生理盐水10mg-kg-1-d-L均连续给药10do术后10d收集小鼠

血清和肝组织，检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),以及

肝组织匀浆液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和Fe2+水平；苏木素-伊红(H

E)染色后光镜下观察肝组织病理学改变；透射电镜下观察肝细胞线粒体形状和

长度；蛋白质免疫印迹试验(Westernblotting)检测肝组织Nrf2谷胱甘肽

过氧化物酶4(GPX4)、前列腺素-内过氧化物合酶2(PTGS2)的蛋白表达。结

果与Sham组比较，CLP组小鼠血清ALT、AST水平明显升高；镜下可见肝索排

列紊乱，细胞肿胀、坏死，线粒体长度明显变短；肝组织中MDA、Fe2+水平明显

上升，GSH含量明显下降，Nrf2GPX4蛋白表达下降，PTGS2蛋白表达明显升高。

与CLP组比较，CLP+Fer-1组和CLP+Curumin组血清ALT、AST水平明显降低〔A

LT(U/L):80.65+19.44103.45+20.52比283.50+37.12,AST(U/L):1

03.33+11.90127.33+15.79比288.67±36.82,均PV0.05）；镜下可见肝

索欠规整，细胞轻微肿胀，线粒体长度明显增加(um：1.42+0.09.1.43+0.

21比1.07+0.25,均P0.05)；肝组织中MDA、Fe2+水平明显下降，GSH含量

明显升高〔MDA(mol/g):0.87+0.231.85+0.43比4.47±0.95,Fe2+(ug

/g):63.80+7.1567.48+6.28比134.52±14.32,GSH(mol/g):1.95+0.

29、1.95+0.45比0.55±0.29,均PV0.05)；肝组织Nrf2GPX4蛋白表达明

显升高，PTGS2蛋白表达明显下降(Nrf2/GAPDH：1.80+0.282.10+0.43比0.

70+0.24,GPX4/GAPDH：0.80±0.06、0.93+0.07比0.48+0.02,PTGS2/GAPD

H：0.76+0.05、0.84+0.01比1.02+0.09,均P0.05)；而CLP+Erastin组、

CLP+ML385组上述指标结果则相反，血清ALT、AST水平明显升高〔ALT(U/L):

344.52+40.79321.70+21.10比283.50+37.12,AST(U/L):333.50+27.

90、333.00+16.67比288.67+36.82,均PV0.05)；镜下可见肝索排列紊乱,

细胞明显肿胀、坏死，线粒体长度明显变短(um：0.78±0.13、0.67+0.07比

1.07+0.25,均P0.05)；肝组织中MDA、Fe2+水平明显升高，GSH含量明显

下降(MDA(mol/g):5.92±1.06、5.62+0.56比4.47±0.95,Fe2+(ug/g)：

151.40+8.03151.88+8.68比134.52±14.32,GSH(mol/g